转染miR-122及CD81/Occludin树鼩骨髓间充质干细胞建立对HCV易感细胞和动物模型研究

批准号:
31601907
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
19.0 万元
负责人:
陆彩霞
依托单位:
学科分类:
C0408.实验动物学
结题年份:
2019
批准年份:
2016
项目状态:
已结题
项目参与者:
孙晓梅、王文广、李娜、尹博文、宋庆凯
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中文摘要
丙型肝炎是严重危害人类健康的重要疾病,控制丙型肝炎危害的关键是建立合适的细胞模型和动物模型以利于HCV疫苗及药物的研发。现有的HCV细胞和动物模型都存在明确显著的局限性,限制了其应用。如何建立既能传代培养又能对各型HCV易感的细胞模型和提高现有HCV树鼩动物模型感染率是亟待解决的科学问题。围绕这一关键科学问题,本课题将通过向树鼩骨髓间充质干细胞转染促进HCV增殖的肝脏特异性表达的miR-122,及介导HCV入胞的两个最为关键的CD81和Occludin受体,研究转染后该细胞生物学特性及其对HCV的易感性、敏感性,确定miRNA-122、HCV受体对细胞分化程度的影响及提高对HCV感染的情况,同时研究其在体内的分化和感染特性。研究结果将为HCV研究提供新的细胞模型资源和最终建立稳定重复性好的树鼩HCV动物模型及接近实验动物模式化水平奠定基础,对丙型肝炎的防治具有重要意义。
英文摘要
Hepatitis C virus (HCV) is a leading cause of live disease worldwide. As HCV infects only human and chimpanzee cells, antiviral therapy and vaccine development have been hampered by the lack of a convenient small-animal model. Establishing a subculture in vitro susceptible cells model for various types of HCV and how to improve the infection rate of the existing tree shrew HCV animal model is a scientific problem to be solved. In this study we transfected the liver-specific miR-122, which is required for efficient HCV RNA replication both in cell culture and in vivo, and CD81/Occludin, which is the minimal set of entry factor required for HCV uptake into cells, to bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSCs) of tree shrew. To investigated how miR-122 andCD81/Occludin influence HCV replication and cell differentiation in the BM-MSCs. Our studies will provide a new HCV cell model and lay the foundation to build a stable, reproducible tree shrew HCV animal model, which will helpful to prevention and treatment of Hepatitis C.
丙型肝炎是严重危害人类健康的疾病。HCV目前尚无预防疫苗,直接抗病毒药物(DAA)治疗HCV取得显著成绩,但HCV能够经过进化对这些抗病毒药物产生耐药性,从而导致治疗失败,并且对部分基因型的治疗效果仍不理想。因此仍然有必要开展HCV的相关研究。合适的HCV细胞和动物模型是研究HCV致病机制、疫苗及药物开发的必要条件。树鼩是比啮齿类动物更接近非人灵长类的动物,利用树鼩建立HCV模型有望替代黑猩猩研究HCV的相关机制和疫苗研发。本项目通过将介导HCV入胞的两个关键受体(CD81、OCLN)和既能促进干细胞向肝样细胞分化又能促进HCV增殖的miR-122转染至树鼩骨髓间充质干细胞(BM-MSCs),建立一个对HCV易感的细胞模型。通过尾静脉注射构建的腺相关病毒载体建立对HCV感染的树鼩HCV模型。研究结果显示在转染了基因的BM-MSCs上支持HCV复制,在同时转染CD81/OCLN和CD81/OCLN/miR-122的靶细胞上,除了支持HCV复制外,还产生了具备感染性的病毒颗粒。体内感染后实验组均能间歇性地检测到HCV病毒载量。这在利用骨髓间充质干细胞建立HCV细胞模型尚属首次,为开展HCV生命周期研究、抗HCV药物筛选、疫苗研发提供了新的技术平台;HCV树鼩体内模型的构建,可为HCV致病机制和HCV候选疫苗株的临床前评价提供理想的小动物实验技术平台。
期刊论文列表
专著列表
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会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2019
期刊:中国比较医学杂志
影响因子:--
作者:苗雨润;李明学;李娜;王文广;匡德宣;仝品芬;孙晓梅;罕园园;陆彩霞;代解杰
通讯作者:代解杰
DOI:--
发表时间:2017
期刊:实验动物与比较医学
影响因子:--
作者:苗雨润;李娜;匡德宣;宋庆凯;袁圆;王璇;张志成;陆彩霞
通讯作者:陆彩霞
DOI:--
发表时间:2018
期刊:实验动物科学
影响因子:--
作者:苗雨润;李娜;匡德宣;宋庆凯;袁圆;王璇;张志成;陆彩霞
通讯作者:陆彩霞
DOI:--
发表时间:2019
期刊:中国实验动物学报
影响因子:--
作者:李明学;王文广;李娜;匡德宣;仝品芬;黄鑫;黎晓慧;孙晓梅;陆彩霞
通讯作者:陆彩霞
CircRNAs in the tree shrew (Tupaia belangeri) brain during postnatal development and aging.
树鼩 (Tupaia belangeri) 出生后发育和衰老过程中大脑中的 CircRNA
DOI:10.18632/aging.101437
发表时间:2018-04-30
期刊:Aging
影响因子:--
作者:Lu C;Sun X;Li N;Wang W;Kuang D;Tong P;Han Y;Dai J
通讯作者:Dai J
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