淫羊藿苷联合诱导多能干细胞分化的肾脏祖细胞治疗急性肾损伤的实验研究
批准号:
82074171
项目类别:
面上项目
资助金额:
55.0 万元
负责人:
张登禄
依托单位:
学科分类:
中西医结合临床基础
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
张登禄
中文摘要
研究证实肾脏损伤后会激活体内的肾脏祖细胞参与损伤修复。多项研究发现淫羊藿苷具有保护受损肾脏、促进肾脏损伤修复的作用,但该过程中淫羊藿苷与成体肾脏祖细胞的关系未见文献报道。研究表明成体肾脏存在Wnt应答肾脏祖细胞,而淫羊藿苷具有激活Wnt信号通路的作用,因此申请人推测淫羊藿苷在参与肾脏损伤修复过程中可能促进成体肾脏祖细胞增殖。已有研究表明外源(多能干细胞分化产生的)肾脏祖细胞具有促进肾脏损伤修复的作用,但治疗效果并不理想。前期研究发现,多能干细胞诱导产生的肾脏祖细胞存在非常高的异质性,本研究拟根据分子标志物将外源肾脏祖细胞分群,利用疾病模型筛选出治疗急性肾损伤最佳的亚群。总之,本研究拟阐明淫羊藿苷与急性肾损伤修复过程中的成体肾脏祖细胞的关系,同时筛选出治疗急性肾损伤效果最佳的外源肾脏祖细胞亚群,最后探讨淫羊藿苷联合外源肾脏祖细胞(亚群)用于治疗急性肾损伤的作用及机制,为临床治疗提供实验支持。
英文摘要
It has been confirmed that kidney progenitor cells can be activated to participate in the repair of renal injury. Many studies have found that icariin can protect the damaged kidney and promote the repair of kidney damage, but the relationship between icariin and adult kidney progenitor cells has not been reported. The results show that there are Wnt responsive kidney progenitor cells in the adult kidney, and icariin can activate Wnt signaling pathway, so the applicant speculates that icariin may promote the proliferation of the adult kidney progenitor cells in the process of renal injury and repair. Previous studies have shown that exogenous (derived from pluripotent stem cells ) kidney progenitor cells can promote the repair of renal injury, and the therapeutic effect is not ideal. Previous studies have found that the kidney progenitor cells induced by pluripotent stem cells have very high heterogeneity. In this study, according to the molecular markers, the exogenous kidney progenitor cells are grouped, and the disease model is used to select the best subgroup for the treatment of acute renal injury. In conclusion, this study aims to elucidate the relationship between icariin and adult kidney progenitor cells in the process of acute renal injury repair, and to select the best exogenous kidney progenitor cell subsets for the treatment of acute renal injury. Finally, to explore the role and mechanism of icariin combined with exogenous kidney progenitor cells (subsets) in the treatment of acute renal injury, so as to provide experimental basis for clinical treatment.
本项目围绕淫羊藿苷(ICA)与肾脏祖细胞(RPC)在急性肾损伤(AKI)治疗中的作用及机制展开系统研究,取得以下主要成果。(1)淫羊藿苷防治AKI的疗效与机制;通过叶酸(FA)诱导的小鼠AKI模型,证实ICA在预防性和治疗性干预中均显著改善肾功能(降低血清肌酐、尿素氮水平),减轻肾小管损伤,并逆转AKI相关标志物(KIM-1、NGAL、Klotho)的异常表达。蛋白质组学分析发现,FA诱导的AKI激活补体和凝血级联反应通路,而ICA通过抑制该通路及调控铁死亡相关蛋白(如ACSL4、SLC3A2)发挥保护作用。此外,ICA可通过调控组蛋白甲基化、乙酰化、白细胞介导的免疫反应及肾脏祖细胞标志物SOX9的表达发挥对AKI的治疗作用。(2)成体肾脏来源CD133+祖细胞(RPC)的治疗AKI疗效与机制:研究发现,成体肾脏来源的CD133+ RPC在预防和治疗FA-AKI中疗效显著优于诱导多能干细胞来源的肾脏祖细胞(NPC)。蛋白质组学分析结果提示RPC可通过上调线粒体核糖体蛋白(如Mrpl2、Mrps12)恢复线粒体功能,并下调组织相容性复合物蛋白(如H2-D1、H2-K1)、STAT1等,减轻炎症反应,从而促进肾脏修复。(3)联合治疗AKI的疗效与机制:RPC与ICA联合治疗可以显著改善AKI小鼠的肾功能(肌酐和尿素水平显著降低),其机制涉及下调炎症相关蛋白(如Stat1、Cd74)、组织相容性复合物蛋白及上调线粒体功能相关蛋白、ATP合成酶、溶质载体家族蛋白等。KEGG分析显示,联合干预可以显著抑制NF-kB信号通路等通路,提示两种干预方式在抑制纤维化方面存在协同作用。(4)淫羊藿苷作用靶点的筛选与验证:通过蛋白质芯片和Pull-down联合质谱技术,筛选出ICA的直接结合蛋白752种(人源)和250种(小鼠),其中STAT3为关键候选靶点。细胞热位移实验证实ICA与STAT3结合,为阐明其调控炎症与修复的分子机制提供了重要线索。
黄芪-丹参药对通过调控管周毛细血管再生和PMT促进肾脏损伤修复的机制研究
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批准号:82374238
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项目类别:面上项目
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资助金额:49万元
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批准年份:2023
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负责人:张登禄
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依托单位:
国内基金
海外基金