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基于食物成分相互作用及代谢组学技术构建咖啡酰奎宁酸高效生物利用食物运载体系及其机理研究

批准号:
32060535
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
熊建华
依托单位:
学科分类:
食品与肠道菌群
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
熊建华

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
咖啡酰奎宁酸(CQAs)具较强的抗菌、抗病毒等活性,是食物中重要的功能成分。研究组前期调控悬浮培养金银花细胞的次生代谢使CQAs积累达到9.6%(干重)以上。本项目针对其生物利用率不高现状,拟利用代谢组学技术和食物成分相互作用原理构建咖啡酰奎宁酸高效生物利用食物运载体系并解析其机理。利用液质的代谢组学技术分析CQAs在体内的代谢轮廓、代谢标志物并获得生物利用率科学计量方法;将食物基质逐步细分类,采用单因素及响应面设计实验筛选促进CQAs生物利用的食物基质;利用光谱、色谱、质谱技术分析食物基质与功能成分生物利用率的构-效关系、量-效关系;优化条件构建CQAs高效食物运载体系;从体系中CQAs的溶解性、释放度、跨细胞膜转运特性阐明作用机理。研究结果将为CQAs高效生物利用食物运载体系构建和其机理解析提供理论依据,并为后续CQAs健康产品开发和其功能在体内充分发挥提供潜在的技术支撑。
英文摘要
Caffeoylquinic acid (CQAs) has strong biological activities such as antibacterial, antiviral, and is an important functional component in food. From the results of our group′s previous study, the accumulation of CQAs in cells was improved and reached to 9.6% (dry weight) by regulating the secondary metabolism of suspension cultured Lonicera japonica cells. This project aims at construct a caffeoquinic acid high-efficiency food delivery system and analysis its mechanism via using metabolomics and food ingredients interaction principles to overcome its low bioavailability. The LC-MS metabolomics will be used to analyze the metabolic profile and metabolic markers of CQAs in the body and to obtain a scientific measurement method of bioavailability. The food substrate will be gradually classified according to structural characteristics. The food matrix which significantly affect the bioavailability of CQAs will be screen by the single-factor and response surface design experiments. The structure-effect relationship and dose-effect relationship between functional components bioavailability and food matrix will be analyzed using spectrum, chromatography and mass spectrometry. a CQAs efficient food delivery system will be constructed by optimizing conditions, and the mechanism of action will be elucidated via analysis of the solubility, release degree, and transcellular membrane transport characteristics of CQAs in the system. The research results will provide a theoretical basis for the construction of CQAs efficient bioavailable food delivery system and its mechanism interpreting. It also provides a potential technical support on subsequent developments of CQAs health product and full applications in the body .
绿原酸类物质(CGAs),具有较好的生物学作用,但其生物利用率不高,项目探索CGAs口服后的代谢规律,建立检测方法,构建其高效的脂质运载体(CGA-TPGS-LP),研究其对提高CGA口服生物利用度的作用。构建了叶酸修饰的绿原酸脂质体(FTCLP),利用细胞实验和动物实验验证其抗炎效果并探讨机理。主要研究内容和结果数据如下:.(1)大鼠口服CGA后血浆主要代谢物、检测方法及生物利用度研究:禁食状态下主要代谢产物有:甲基绿原酸、咖啡酸等10种代谢产物,而正常生理组中未检测到CA只有9种代谢产物;使用含2%乙酸的甲醇作为血浆蛋白质沉淀剂,采用梯度洗脱及多级反应检测模式定量分析血浆中CGA及其主要代谢产物;口服CGA后,大鼠血浆中CGA浓度迅速上升,Tmax为0.5h,正常生理状态下血浆CGA的Cmax、AUC(0-t)均低于禁食大鼠,但t1/2有所延长,除个别代谢物之外,日常饮食对CGA及代谢物吸收量有阻碍作用,但延长它们在体内驻留时间。.(2)CGA-TPGS-LP的构建与表征:磷脂400 mg、磷药比为5:1、磷胆比为7:1以及磷TPGS比为8:1构建脂质体,包封率83.22%,载药率11.21%,呈100 nm的均匀球状囊泡,具有磷脂双分子膜,TPGS疏水部分嵌入双分子内、亲水部分在表面形成覆盖层,CGA被包裹在内。.(3)CGA-TPGS-LP稳定性、体外释放及大鼠口服生物利用度:储存30d,包封率仍高于70%,具有较好的稳定性;模拟胃液(肠液)中CGA-TPGS-LP将大鼠口服CGA的t1/2从1.58 h延长至2.53 h,AUC(0-t)提高了约1.38倍,AUC(0-∞)提高约1.52倍,此外,CGA口服后代谢产物的Cmax略有提高,以DHCA为最。.(4)FTCLP对Caco-2炎症细胞及小鼠炎症性肠病炎症反应的抗性效果及机制:FTCLP可显著抑制NO的产生和下调IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达,缓解细胞炎症反应。可以显著改善小鼠炎症性肠病症状。显著降低小鼠血清和结肠中INF-γ,IL-1β和IL-6的含量,并在mRNA水平上抑制促炎细胞因子表达,增加JAK激酶和STAT3的表达量。此外,FTCLP调节小鼠肠道菌群。由此,通过脂质体运载增强了CGA的抗炎特性。.脂质载体有助于提高CGA稳定性、促进生物利用率提高及功效发挥。
金银花细胞悬浮培养生物积累咖啡酰奎宁酸的诱导调控及其分子机制研究
  • 批准号:
    31560452
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    40.0万元
  • 批准年份:
    2015
  • 负责人:
    熊建华
  • 依托单位:
金银花叶抑制致病菌的物质基础及其分子机理研究
  • 批准号:
    31060226
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    25.0万元
  • 批准年份:
    2010
  • 负责人:
    熊建华
  • 依托单位:
国内基金
海外基金