基于通用DNA身份证的动物药材真伪、掺伪与定量鉴定的研究
批准号:
82073972
项目类别:
面上项目
资助金额:
56.0 万元
负责人:
蒋超
依托单位:
学科分类:
中药鉴定
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
蒋超
中文摘要
通用性、特异性和简易性的矛盾是制约统一、标准化中药分子鉴定方法建立的关键因素,“特异不通用,通用不特异”是动物药材分子鉴定的普遍难题。除真伪鉴别外,对正伪混合的掺伪品进行非定向筛查、物种鉴定,及掺伪程度进行定量是分子鉴定的又一难题。本项目将法庭科学中的个体DNA识别技术、系统基因组学和通用引物鉴别技术结合在一起,提出一种以DNA序列插入/缺失为核心标记,以多色荧光毛细管电泳分型为核心技术,适用于所有动物药材,能同时解决真伪、掺伪鉴定与定量分析的新型DNA分子鉴定技术——通用DNA身份证鉴定,并建立相应DNA数据库和物种鉴定算法。旨在建立“所有物种一套引物,每个物种一张DNA身份证”的通用分子鉴定新方法,用于《中国药典》收载动物药材的真伪、掺伪与定量鉴定。
英文摘要
The contradiction of universality, specificity and simplicity is the critical factor restricting the establishment of a uniformed and standardized method to identify herbal medicines. "Special is not universal, universal is not specific, universal and specific method is not simple" is a common tough problem in identify animal medicines. In addition to authenticity identification, non-directional screening, species identification, and quantification of adulteration of adulterated products is another challenge for molecular identification. This project integrate individual DNA recognition technology from forensic science field, phylogenomics from genomics field, and universal primer identification technology from systematics field, aims to establish a novel universal gene identification card (Uni-ID) identification technology with DNA insertion/deletion as the core marker and multicolor fluorescent capillary electrophoresis typing as the core technology and applicable to all animal medicinal materials. This Uni-ID identification technology could solve the authenticity, admixture detect, and quantitative analysis simultaneously, and then establishes a corresponding DNA identification database and species identification algorithm. Finally, a new molecular identification method of "a set of primers for all species and a DNA ID for each species" was established for the authenticity, adulteration and quantitative identification of animal medicines contained in the Chinese Pharmacopoeia.
通用性、特异性和简易性的矛盾是制约统一、标准化中药分子鉴定方法建立的关键因素。除真伪鉴别外,对正伪混合的掺伪品进行非定向筛查、物种鉴定,及掺伪程度进行定量是分子鉴定的又一难题。本项目使用提出的通用DNA身份证鉴定新方法,用于《中国药典》收载动物药材的真伪、掺伪与定量鉴定。.通过开展了本草考证、利用动物分类学和DNA分子鉴定进行基原鉴定。采集了主要动物药材品种并进行高通量测序组装获得线粒体基因组。利用生物信息学分析技术挖掘插入/缺失变异频繁的高变异区,在两侧设计能扩增动物药材物种的候选通用引物16对,引物挂载荧光基团后进行荧光毛细管电泳(STR分型),筛出4对引物可用于动物药材鉴定,从而形成特异的通用DNA指纹图谱,编码形成通用DNA身份证。选择蜈蚣、鼠妇虫、水牛角、地龙等动物药材作为代表开展真伪、掺杂和定量鉴定研究,证实建立的通用DNA身份证鉴定方法可实现《中国药典》动物药材真伪、掺伪和定量鉴定。在此基础上还基于线粒体基因组结果开发了全蝎、五倍子等动物药材的专属性DNA分子鉴别方法。项目执行过程中,共发表SCI论文8篇,中国国内核心期刊12篇,其中16篇为第一标准,4篇为第二标注;申请专利1项;发现并命名新物种12个;发现中国动物新纪录科2个。
人参属分子年龄标记物的识别与开发研究
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批准号:81703653
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:20.0万元
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批准年份:2017
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负责人:蒋超
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依托单位:
国内基金
海外基金