生防菌Hhs.015防治苹果腐烂病的机理研究

苹果树腐烂病是我国苹果产区主要病害，为了对该病害进行安全持续控制，生物防治是一个有效而安全的防治措施。本项目对生防放线菌Hhs.015进行了绿色荧光蛋白遗传标记，研究其施用于苹果组培苗后在植物体内的定殖和消长规律，发现菌株Hhs.015在植株体内可以定殖，且呈先增后减的趋势；建立了以G6PDH为靶标的特异性qPCR体系用于检测使用Hhs.015对病斑形成前后树皮样品中V. mali数量变化，检测结果表明Hhs.015可以显著减少病斑形成前的树皮样品中V. mali总数量，但对病斑形成后的病健交界处树皮样品中V. mali数量没有影响。使用Hhs.015可显著地降低内切多聚半乳糖醛酸酶基因的表达，并显著地增加胼胝质合成酶基因的表达,促进植物防卫；对涂抹Hhs.015病健交界处树皮样品中胼胝质积累进行了组织学观察，发现筛管中出现大量胼胝质积累，与定量结果一致。与Hhs.015皿内对峙条件下的V. mali菌丝的亚细胞结构进行观察结果表明20h时，V.mali菌丝出现细胞壁破裂、横隔和晕圈；24h时，细胞核降解,线粒体数量增多，并出现线粒体聚集与膨大现象；48h时，菌丝细胞壁加厚，细胞质几乎全部降解并形成大的空液泡，细胞核与细胞质完全分离并出现细胞核的完全降解。该研究阐明了Hhs.015防治苹果腐烂病的部分作用机制，将为Hhs.015应用在苹果腐烂病生物防治实践提供理论依据和参考。