NK细胞活化性受体CD96介导的信号途径研究

免疫受体胞质区ITIM模体通常传递抑制信号，某些免疫受体的ITIM可传递活化信号，CD96胞浆区有1个ITIM基序，可能参与活化信号的传递。为研究CD96的信号转导途径，拟将CD96分子ITIM基序中的酪氨酸突变为苯丙氨酸并转染细胞后，用免疫共沉淀法证实CD96分子ITIM对SHP-2磷酸酶的募集作用；拟建立新鲜NK细胞克隆，用单抗交联CD96使NK细胞活化，用Luminex技术测定Ras/Erk途径信号分子的变化，证实CD96对Ras/Erk途径的活化作用；单抗刺激NK细胞后，用免疫共沉淀法从细胞提取液中获取与CD96受体结合的分子，用质谱法对结合分子进行定性分析，探索CD96的功能相关分子。用单抗交联CD96使NK细胞活化，用Luminex测定细胞因子和颗粒酶的分泌，探索CD96诱导的免疫调节机制。从而揭示CD96的信号转导途径，为了解其功能的分子机制提供重要依据。