植物细胞高尔基体分泌泡分泌途径的研究

在前期工作所发现的拟南芥花蜜腺细胞高尔基体分泌泡整体出胞现象的基础上以拟南芥和油菜花蜜腺为材料，运用激光共聚焦显微技术、快速冷冻、低温置换技术和免疫电镜技术，从显微和亚显微水平及分子水平研究植物细胞高尔基体分泌泡出胞时（过膜）的细节和出胞后的最终归宿，以期进一步认识植物细胞高尔基体分泌泡不同于胞吐作用的分泌途径。研究内容包括1. 高尔基体分泌泡出胞前后的超微结构。以拟南芥和油菜花蜜腺为材料，采用快速冷冻固定技术捕捉分泌泡出胞瞬间的超微结构，进一步完善分泌泡出胞细节。2. 筛选分泌泡膜和细胞质膜的抗体。用不同的抗体以及凝集素WGA（wheat germ agglutinin）等标记高尔基分泌泡膜和细胞膜上的特异性蛋白并且用SDS-PAGF和免疫印迹法筛选出分泌泡膜和细胞膜的最佳抗体。3. 采用双重荧光标记和激光共聚焦显微镜技术和免疫胶体金电镜技术对高尔基体分泌泡的分泌途径进行研究。