PCR Conditions for HFE C282Y: Lack of Effect of 5569G/A Polymorphism with 55 °C Annealing
PCR Conditions for HFE C282Y: Lack of Effect of 5569G/A Polymorphism with 55 °C Annealing
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HFE C282Y 的 PCR 条件：55 °C 退火时缺乏 5569G/A 多态性的影响
DOI：
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发表时间：
2000
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
G. Jeffrey
中科院分区：
文献类型：
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作者：
C. Chin;J. Beilby;E. Rossi;G. Jeffrey
HFE基因突变命名为C282 Y（g.5474G→A; GenBank登录号Z92910），通常通过Feder等（1）描述的引物在PCR中扩增基因组DNA，然后基于Sna B1（2）或Rsa 1（3）切割位点的产生进行限制性酶切来检测。据报道，位于反义引物结合位点3′端5个核苷酸内的多态性（5569 G/A）导致C282 Y纯合性的假阳性结果（4）。在分析具有5569 G/A多态性的C282 Y杂合子复合体时，由于含有C282 Y的等位基因的选择性扩增而出现假阳性结果。设计了一条新的不与5569 G/A位点结合的反义引物（5′-TACCTCCTCAGGCACTCCTC-3′）。
The HFE gene mutation designated C282Y (g.5474G→A; GenBank accession no. Z92910) is usually detected by the primers described by Feder et al. (1) in a PCR to amplify genomic DNA followed by restriction enzyme cleavage based on the production of either a Sna B1 (2) or a Rsa 1 (3) cut site. A polymorphism (5569G/A) located five nucleotides within the 3′ end of the binding site for the antisense primer has been reported to lead to false-positive results for C282Y homozygosity (4). The false-positive result occurs in analysis of a C282Y heterozygote compound with the 5569G/A polymorphism because of selective amplification of the C282Y-containing allele. A new antisense primer (5′-TACCTCCTCAGGCACTCCTC-3′) that did not bind the 5569G/A site was designed (4 …
影响因子：
11.2
作者：
Zhihong Lu;Ruiwen Zhang;R. Diasio
通讯作者：
Zhihong Lu;Ruiwen Zhang;R. Diasio
DOI：
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发表时间：
1997
期刊：
Cancer research.
影响因子：
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作者：
Johnson,MR;Wang,K;Tillmanns,S;Albin,N;Diasio,RB
通讯作者：
Diasio,RB