骨髓源性生长因子对高糖诱导H9c2细胞焦亡的改善作用

骨髓源性生长因子对高糖诱导H9c2细胞焦亡的改善作用
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DOI：
10.16016/j.1000-5404.202011210
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发表时间：
2021
期刊：
第三军医大学学报
影响因子：
--
通讯作者：
石蓓
石蓓
中科院分区：
其他
文献类型：
--
作者：
张玉;王艳;赵然尊;仇治梅;龙仙萍;李朝富;陈文明;石蓓

文献摘要

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目的探讨骨髓源性生长因子(myeloid-derived growth factor,Mydgf)是否通过调控NLRP3改善高糖诱导的心肌细胞焦亡。方法培养大鼠心肌细胞株H9c2,实验分为4组: ①正常组(normal,Nor)为正常培养的H9c2细胞;②高糖组(high glucose,HG)予以50 mmol/L葡萄糖干预H9c2细胞24 h;③Mydgf组采用25 ng/mL重组Mydgf蛋白处理细胞12 h,随后以50 mmol/L葡萄糖干预H9c2细胞24 h;④Necrosulfonamide组(NSA)采用32 μmol/L NSA处理细胞0.5 h,然后予50 mmol/L葡萄糖干预H9c2细胞24 h。Western blot法检测H9c2细胞中天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(cleaved Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ACS)、炎症复合体(NLRP3)及成孔蛋白gasdermin D(GSDMD)的表达水平。 ELISA法检测细胞培养液中IL-1β和IL-18的分泌量。CCK-8法检测Mydgf及NLRP3对H9c2细胞活力的影响。将携带NLRP3的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)慢病毒载体(NLRP3-EGFP)及空病毒载体(EGFP)分别转染至H9c2细胞,做回复实验,检测焦亡相关指标变化。结果Western blot结果显示,HG组焦亡相关蛋白cleaved Caspase-1、ACS、NLRP3、GSDMD表达量较正常组明显增高(P 25 ng/mL的Mydgf明显降低H9c2细胞活力(P 0.05),而NLRP3-EGFP组中NLRP3的mRNA及蛋白表达均显著增高(P <0.05)。回复实验的Western blot结果显示,在高糖环境中,与Mydgf组相比,Mydgf+NLRP3-EGFP组中焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1表达显著增加(P <0.05);ELISA检测结果也表明IL-1β和IL-18表达较Mydgf组明显增高(P <0.05)。结论Mydgf可能通过抑制NLRP3来改善高糖诱导的心肌细胞焦亡。