Synthese modifizierter Oligonucleotid-Sonden für den DNA-Nachweis durch katalytische Signalamplifikation
Synthese modifizierter Oligonucleotid-Sonden für den DNA-Nachweis durch katalytische Signalamplifikation
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通过催化信号放大合成用于 DNA 检测的修饰寡核苷酸探针
DOI：
10.11588/heidok.00006945
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发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
Nora Graf
中科院分区：
文献类型：
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作者：
Nora Graf
这项工作需要合成金属复合物-功能性寡核苷酸和肽核酸（PNA），并将其作为DNA测序的探针。在DNA模板上进行金属催化分析，并通过化学或酶催化进行信号传递。Eine Nucleinsäure kann als Templat funktionalisierte Oligonucleotide in räumliche Nähe zueinander bringen und deren intermolekulare Reaktion besophageal unigen. Die im Rahmen dieser Arbeit untersuchte Redoxreaktion zwischen einer Metallkomplex- und einer Thiol-funktionalisierten Peptidnucleinsäure am DNA-Templat wurde fluorimetrisch verfolgt.为了进一步研究信号传导，DNA-寡核苷酸与金属复合物的结合，与金属（Cu Ⅱ，Zn Ⅱ）复合DNA的杂交。Das CuII-Ion（bzw. ZnII-Ion）激活剂作为Cofaktor einen chemischen Präkatalysator（bzw. ein Apoenzyme）and die anschließend durch den Katalysator（bzw. das Holoenzym）通过Umsetzung fluoro-oder chromogener Substrate fluorimetrisch、photometrisch or sogar für das Auge direkt sichtbar启动DNA靶向反应。Das DNA-Target konnte mithilfe dieser Signalwandlung（DNA - Metallion）mit hoher Emfindlichkeit und Sequenzspezifität nachgewiesen韦尔登. Die verwendeten Metallkomplex-funktionalisierten Oligonucleotide wurden zum besseren Verständnis der Signalwandlung hinsichtlich irrer pronunciischen und kinetischen Stabilität charakterisiert.在一种不同的寡核苷酸缀合物中，金属Cu II作为分子内聚合物，因此可以韦尔登结合一种形式的互补核。
Die Arbeit behandelt die Synthese Metallkomplex-funktionalisierter Oligonucleotide und Peptidnucleinsäuren (PNAs) und deren Anwendung als Sonden für den sequenzspezifischen DNA-Nachweis. Zum einen wurde dazu Metallkatalyse am DNA-Templat genutzt, zum anderen Signalverstärkung durch chemische oder enzymatische Katalyse. Eine Nucleinsäure kann als Templat funktionalisierte Oligonucleotide in räumliche Nähe zueinander bringen und deren intermolekulare Reaktion beschleunigen. Die im Rahmen dieser Arbeit untersuchte Redoxreaktion zwischen einer Metallkomplex- und einer Thiol-funktionalisierten Peptidnucleinsäure am DNA-Templat wurde fluorimetrisch verfolgt. Für die Nachweisreaktionen, die auf Signalverstärkung beruhen, wurden Konjugate von DNA-Oligonucleotiden mit Metallkomplexen synthetisiert, die bei Hybridisierung mit komplementärer DNA das Metallion (CuII, ZnII) freisetzen. Das CuII-Ion (bzw. ZnII-Ion) aktiviert als Cofaktor einen chemischen Präkatalysator (bzw. ein Apoenzym) und die anschließend durch den Katalysator (bzw. das Holoenzym) initiierten Reaktionen machen das DNA-Target durch Umsetzung fluoro- oder chromogener Substrate fluorimetrisch, photometrisch oder sogar für das Auge direkt sichtbar. Das DNA-Target konnte mithilfe dieser Signalwandlung (DNA - Metallion) mit hoher Empfindlichkeit und Sequenzspezifität nachgewiesen werden. Die verwendeten Metallkomplex-funktionalisierten Oligonucleotide wurden zum besseren Verständnis der Signalwandlung hinsichtlich ihrer thermodynamischen und kinetischen Stabilität charakterisiert. In einer Variante dieser Oligonucleotid-Konjugate wirkte das Metallion CuII als intramolekularer Fluoreszenzlöscher, sodass die Bindung einer komplementären Nucleinsäure in Form eines Fluoreszenzsignals verfolgt werden kann.