GREATLY EXTENDED VIABILITY OF RAT-BRAIN STORAGE-VESICLES IN AN INTRACELLULAR MEDIUM BASED UPON A NON-PERMEANT POLYANION
GREATLY EXTENDED VIABILITY OF RAT-BRAIN STORAGE-VESICLES IN AN INTRACELLULAR MEDIUM BASED UPON A NON-PERMEANT POLYANION
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DOI：
10.1016/0024-3205(81)90608-1
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发表时间：
1981-01-01
期刊：
影响因子：
6.1
通讯作者：
RUTH, JA
中科院分区：
文献类型：
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作者：
DISBROW, JK;RUTH, JA
在基于聚丙烯酸（平均分子量 5000）的新培养基中对 MgATP 刺激的大鼠脑神经元储存囊泡 (-)-3H-去甲肾上腺素 (NE) 的积累进行了表征。该培养基可以仔细调节 K+ 浓度 (140 mM)，具有较大的缓冲容量并且不渗透膜。光散射测量证实了悬浮在该介质中的囊泡的渗透稳定性。在饱和(10-5M)和非饱和(2×10-7M)浓度的NE下检查该系统(37°)中(-)-3H-NE(Km 1×10-6M)的囊泡积累。在 10-5 M NE 下，摄取在 5 分钟时达到饱和，并在长达 1 小时内保持稳定，最大摄取水平（pmol/mg 蛋白质）为 15.7 .+-。 0.30（37°），3.0.+-。 0.49（0°），4.4.+-。 0.22（利血平体内预处理）和 6.0.+-。 0.79（不含 MgATP）。 2 次。 10-7 M NE 摄取是双相的，最大摄取水平（pmol/mg 蛋白质）为 4.04.+-。 0.14（37°），0.19.+-。 0.01（0°），0.95.+-。 0.06（利血平）和 0.83.+-。 0.08（不含 MgATP）。在该介质中冷藏 24 小时的囊泡制剂显示出与急性测量的性质相似的性质（NE = 2.2 × 10-7 M）。
The MgATP-stimulated accumulation of (-)-3H-norepinephrine (NE) by rat brain neuronal storage vesicles was characterized in a new medium based upon polyacrylic acid (avg. MW 5000). The medium allows careful regulation of K+ concentration (140 mM), has a large buffer capacity and is non-permeant to membranes. Light scattering measurements confirmed the osmotic stability of vesicles suspended in this medium. Vesicular accumulation of (-)-3H-NE (Km 1 .times. 10-6 M) in this system (37.degree.) was examined under saturating (10-5 M) and non-saturating (2 .times. 10-7 M) concentrations of NE. At 10-5 M NE, uptake saturated at 5 min and remained stable for periods up to 1 h, with maximal uptake levels (pmol/mg protein) of 15.7 .+-. 0.30 (37.degree.), 3.0 .+-. 0.49 (0.degree.), 4.4 .+-. 0.22 (reserpine-pretreated in vivo) and 6.0 .+-. 0.79 (without MgATP). At 2 .times. 10-7 M NE uptake was biphasic with maximal uptake levels (pmol/mg protein) of 4.04 .+-. 0.14 (37.degree.), 0.19 .+-. 0.01 (0.degree.), 0.95 .+-. 0.06 (reserpine) and 0.83 .+-. 0.08 (without MgATP). Vesicle preparations refrigerated in this medium for 24 h displayed properties similar to those measured acutely (NE = 2.2 .times. 10-7 M).