靶向B细胞并特异结合其分泌IL-10的重组融合蛋白的构建、表达和初步鉴定

靶向B细胞并特异结合其分泌IL-10的重组融合蛋白的构建、表达和初步鉴定
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DOI：
10.13523/j.cb.20180201
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发表时间：
2018
期刊：
中国生物工程杂志
影响因子：
--
通讯作者：
潘勤
潘勤
中科院分区：
其他
文献类型：
--
作者：
赵荣;陈含宇;黄春;章晓联;潘勤

文献摘要

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目的:CD19单链抗体可变区(single-chain fragment variable)scFv能特异性识别结合B细胞表面的CD19分子,白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)是调节性B细胞(Breg)的主要特征之一。旨在构建CD19scFv和IL-10受体1(IL-10R1)胞外段的重组融合蛋白,拟用该融合蛋白捕捉和封闭Breg细胞分泌的IL-10。方法:CD19scFv和IL-10R1胞外段克隆到pET-28a原核质粒上,E.coli BL21(DE3)工程菌表达蛋白通过镍柱富集和纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定,Pull down实验验证蛋白与CD19分子和IL-10细胞因子的结合。结果:成功表达CD19scFv-IL-10R1融合蛋白,该融合蛋白能在体外同时结合CD19和IL-10分子。结论:CD19scFv-IL-10R1融合蛋白在体外可以同时结合CD19分子和IL-10分子,具有潜在应用前景可作为特异性抑制Breg的生物小分子。