Redox-Zentren der Chinaldin-4-Oxidase und der Isochinolin-1-Oxidoreduktase: strukturelle und elektronische Charakterisierung mittels ESR-/ENDOR-Spektroskopie

Die molybdänhaltigen Hydroxylasen der Xanthin Oxidase family, Chinaldin-4-oxidase (QualOx) and Isochinolin-1-oxidoreduktase (IsoOr) besbestive zenen - schwefeld - cluster vom型[2Fe2S]。中国醛-4氧化酶（QualOx） enthält zudem noch - inen fad - cofactor。模具金属加工（Mo）与[2Fe2S]及ggf。das FAD-Radikal werden mittelels der Elektronenspin-Resonanz （ESR）和derderhochauflösenden Elektronen-Kern-Doppelresonanz (ENDOR) charakterisiert。大北是同位素法的基本原理之一。[2Fe2S]-簇下57Fe取代物蛋白的研究进展benötigt。研究了13C和2H取代基底物与类似底物的结合，研究了Mo-Zentrum和zizgehen的基物结合。苏兰酶的特性研究Aminosäurereste mit vermuteter funktioneller Bedeutung durch诱变菌与死亡verändertenDabei werden kurzlebige Zustände durch快速冷冻法的研究与应用。Ziel des Vorhabens ist es, under inbeziehung der zuvor and der chinolin -2 oxidoredukase (QuinOr) gewonnenenen erkennisse vergleichend die paramagnetischen Zentren beider Enzyme in Detail darzustellen and are Einordnung in den catalalytischen功能机制机制vorzunehmen。

Die molybdänhaltigen Hydroxylasen der Xanthin Oxidase Familie, Chinaldin-4-oxidase (QualOx) und Isochinolin-1-oxidoreduktase (IsoOr) besitzen als redoxaktive Zentren neben dem Molybdopterin Cofaktor jeweils zwei Eisen-Schwefel-Cluster vom Typ [2Fe2S]. Chinaldin-4-oxidase (QualOx) enthält zudem noch einen FAD-Cofaktor. Die Metallzentren (Mo) und [2Fe2S] und ggf. das FAD-Radikal werden mittels der Elektronenspin-Resonanz (ESR) und der hochauflösenden Elektronen-Kern-Doppelresonanz (ENDOR) charakterisiert. Dabei ist die Modifikation der Proben durch Isotopenaustausch essentiell. Zum einen wird 57Fe substituiertes Protein für die Charakterisierung der [2Fe2S]-Cluster benötigt. Ferner wird ein Schwerpunkt auf der Untersuchung 13C und 2H substituierter Substrate und Analoge liegen, um die Frage der Substratbindung mit dem Mo-Zentrum anzugehen. Zudem sollen Aminosäurereste mit vermuteter funktioneller Bedeutung durch Mutagenese ausgetauscht und die veränderten Enzyme sollen charakterisiert werden. Dabei werden kurzlebige Zustände durch Rapid Freeze Methoden angereichert und untersucht. Ziel des Vorhabens ist es, unter Einbeziehung der zuvor an der Chinolin-2Oxidoreduktase (QuinOr) gewonnenen Erkenntnisse vergleichend die paramagnetischen Zentren beider Enzyme im Detail darzustellen und ihre Einordnung in den katalytischen Funktionsmechanismus vorzunehmen.