Function of pro-sequences in oxidative folding of cystin-knot-proteins

人的神经生长因子（NGF）和骨形态发生蛋白2（BMP-2）是两种由膀胱结节-结构超家族组成的氧化代谢产物，韦尔登是其重要组成部分。蛋白质结构的家庭被认为是一种具有二硫键特征的物质：两种二硫键形成了一个环，通过一种含二硫键的物质。我们被认为是胱氨酸家族韦尔登合成前蛋白质。Während die Prä-Sequenz die Translokation in das endoplasmatische Retikulum vermittelt，ist die Rolle der Pro-Sequenz im molekularen Detail ungeklärt.我们知道，亲神经生长因子是一个很好的选择，它可以促进神经生长因子的天然结构。我们的研究表明，前肽在体外培养细胞结构中的作用是非常重要的。在此基础上，通过对含二硫化物的富钨中间体进行氧化还原和前体分析，发现了富钨中间体的存在。这是一个很好的韦尔登，因为它可以通过分离前肽来进行“反式”转化。在随后的实验中，通过生物物理学分析确定了前体和分离的前肽韦尔登特征。在Zusammenarbeiten soll die biologische Aktivität der Pro-Formen analysiert韦尔登。

Der oxidative Faltungsweg von zwei Vertretern der Cystinknoten-Struktursuperfamilie, humanem NGF (Nerve Growth Factor) und BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) soll untersucht werden. Proteine dieser Strukturfamilie besitzen ein charakteristisches Disulfidmuster: Zwei Disulfidbrücken bilden einen Ring, durch welchen eine dritte Disulfidbrücke hindurchtritt. Die uns bekannten Mitglieder der Cystinknoten-Familie werden als Prä-Pro-Proteine synthetisiert. Während die Prä-Sequenz die Translokation in das endoplasmatische Retikulum vermittelt, ist die Rolle der Pro-Sequenz im molekularen Detail ungeklärt. Wir konnten zeigen, daß pro-NGF wesentlich schneller und mit höheren Ausbeuten als NGF zur nativen Struktur faltet. Ziel unserer Untersuchungen ist es, die Rolle des Pro-Peptids bei der Strukturbildung der beiden Wachstumsfaktoren zu verstehen. Im Rahmen dieser Untersuchungen sollen disulfidverbrückte Faltungsintermediate während der oxidativen Faltung der reifen und der Pro-Formen analysiert werden. Es soll geklärt werden, ob eine 'in trans'-Faltung durch das isolierte Pro-Peptid erfolgen kann. In weiterführenden Experimenten soll durch biophysikalische Analysen Aufschluß über strukturelle Eigenschaften der Pro-Formen und der isolierten Pro-Peptide erhalten werden. In Zusammenarbeiten soll die biologische Aktivität der Pro-Formen analysiert werden.