Development of a fluorezence based testsystem to investigate the mechanism of activation of G protein-coupled receptors

in Rahmen der Förderung dises antrachs soll in System entwickelt werden, mit desessen hilife sich Konformationsänderungen von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren messsen lassen, die durch Liganden industriert werden。大足sollen zunächst zwei荧光团的分子生物学技术与研究进展。Durch zweckmäßige Auswahl der Fluorophore kann dabei einer der beden荧光团Durch die发光二极管发光二极管发光二极管。Bedingt durch eine Konformationsänderung des Rezeptors während der Aktivierung durch einen Agonisten solsoles zu einer Distanzänderung zwischen beiden Fluorophoren kommen, so ass zwischen ihnen in Fluoreszenzresonanzenergietransfer stattfinden kann, der als Signal gemessen werden kann。Die Vorteile dieses Systems gegener berherigen Techniken wären Die Anwendung in lebenenden Zellen and bedingt durch Die Verwendung eines kleinen Fluorophors and bewegunssensor soldem Die Erfassung schneller Aktivierungskinetiken möglich werden。

Im Rahmen der Förderung dieses Antrags soll ein System entwickelt werden, mit dessen Hilfe sich Konformationsänderungen von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren messen lassen, die durch Liganden induziert werden. Dazu sollen zunächst zwei Fluorophore durch molekularbiologische Techniken an geeigneten Stellen in den Rezeptor eingebracht werden. Durch zweckmäßige Auswahl der Fluorophore kann dabei einer der beiden Fluorophore durch die Emission des anderen angeregt werden. Bedingt durch eine Konformationsänderung des Rezeptors während der Aktivierung durch einen Agonisten soll es zu einer Distanzänderung zwischen beiden Fluorophoren kommen, so dass zwischen ihnen ein Fluoreszenzresonanzenergietransfer stattfinden kann, der als Signal gemessen werden kann. Die Vorteile dieses Systems gegenüber bisherigen Techniken wären die Anwendung in lebenden Zellen und bedingt durch die Verwendung eines kleinen Fluorophors als Bewegungssensor sollte zudem die Erfassung schneller Aktivierungskinetiken möglich werden.