Conformational dynamics during the catalytic cycle of RNA helicases studied by time-resolved fluorescence resonance energy transfer (FRET) and single molecule FRET

RNA-Helikasen将ATP抑制剂在细胞内复制RNA，RNA-Umstrukturierung erfordern。直升机行动计划将使核信息模块化。在DEAD-Box-Helikasen中，我们发现了一个非常有用的SAT-Motiv基因突变，它与核结合和RNA结合有关。用于发展过程的基本分子是不合适的。Ich beabsichtige，nukleotide- und substratabhängige Konformationsänderungen in RNA-Helikasen sowie Änderungen der Substratconformation mittels zeitaufgelöster zenzspektroskopie zu untersuchen.在20-80英里的最佳韦尔登距离上，Mit Zenzresonanzenergietransfer können Abstände im Bereich。螺旋酶的构象与螺旋酶的构象之间的关系与螺旋酶的构象之间的关系与螺旋酶对螺旋酶的ATP-水解的化学能之间的关系相同。Einzelmolekülexperimente韦尔登die zeitliche Abfolge von Konformationen und damit einen Konformationszyklus definieren. Vergleiche mit Helikasen psychrophiler Organismen韦尔登Aufschluss geben，welche spezifischen Eigenschaften es ihnen ermöglichen，die höhere Stabilität von RNA-Strukturen bei edriger Temperatur zu überwinden. RNA-Helikasen sind möglicherweise generell an der Faltung großer RNA-Moleküle beteiligt.

RNA-Helikasen katalysieren die ATP-abhängige Entwindung doppelsträngiger RNA in zellulären Schlüsselprozessen, die RNA-Umstrukturierung erfordern. Die Helikase-Aktivität wird vermutlich über nukleotidgesteuerte Konformationsänderungen moduliert. In DEAD-Box-Helikasen verhindern Mutationen im hochkonservierten SAT-Motiv die Kopplung von Nukleotidbindung und RNA-Entwindung. Die molekularen Grundlagen für den Entwindungsprozess sind jedoch unbekannt. Ich beabsichtige, nukleotid- und substratabhängige Konformationsänderungen in RNA-Helikasen sowie Änderungen der Substratkonformation mittels zeitaufgelöster Fluoreszenzspektroskopie zu untersuchen. Mit Fluoreszenzresonanzenergietransfer können Abstände im Bereich von 20-80 Å bestimmt werden. Die Korrelation von Konformationsänderungen der Helikase mit der Entwindungsaktivität wird aufzeigen, wie Helikasen die chemische Energie der ATP-Hydrolyse zum Entwinden von Helizes verwenden. Einzelmolekülexperimente werden die zeitliche Abfolge von Konformationen und damit einen Konformationszyklus definieren. Vergleiche mit Helikasen psychrophiler Organismen werden Aufschluss geben, welche spezifischen Eigenschaften es ihnen ermöglichen, die höhere Stabilität von RNA-Strukturen bei niedriger Temperatur zu überwinden. RNA-Helikasen sind möglicherweise generell an der Faltung großer RNA-Moleküle beteiligt.