Metabolism of benzoate in strictly anaerobic bacteria

Benzoyl-CoA is ein zentrales Intermediat im Stoffwechsel anaerober，aromatenverwertender Bakterien; es wird durch das Schlüsselenzyme Benzoyl-CoA Reduktase dearomatisiert.芳香脱氮酶是一种Eisen-Schwefel蛋白，其还原芳香环的作用是一种化学计量的ATP-水解酶。Aus energetischen Gründen mutilized die Reduktion des aromatischen Ringes in obligat anaeroben Bakterien wie Sulfatreduzierern oder Gärern nach einem anderen，bisher völlig unkannten Mechanismus erfolgen.该Annahme wird unterstützt durch die Beobachtung，dafensulfatreduzierer Selen und Molybdän für das Wachstum auf aromatischen Substanzen benötigen.我们通过HPLC、质谱和NMR技术，在革兰氏阴性多噬脱硫球菌和革兰氏阳性嗜热脱硫菌的苯甲酸盐缓冲液中进行了韦尔登生物化学研究，以生产[Ring-13/14 C]-苯甲酸标记物。Die Experimente韦尔登zunächst mit Zellextrakten durchgeführt; langfristig is eine Anreicherung/Reinigung des ringrezierenden Enzymes geplant.苯甲酸诱导的硒和钼酶韦尔登的鉴定是通过用75硒和99钼对苯甲酸和非芳香化底物进行硫还原来进行的。在二维凝胶电泳中，韦尔登诱导/放射性标记蛋白质N-末端排列，是DNA库中DNA的直接来源。

Benzoyl-CoA ist ein zentrales Intermediat im Stoffwechsel anaerober, aromatenverwertender Bakterien; es wird durch das Schlüsselenzym Benzoyl-CoA Reduktase dearomatisiert. Das Enzym aus dem Denitrifizierer Thauera aromatica ist ein Eisen-Schwefel Protein, welches die Reduktion des aromatischen Ringes an eine stöchiometrische ATP-Hydrolyse koppelt. Aus energetischen Gründen muß die Reduktion des aromatischen Ringes in obligat anaeroben Bakterien wie Sulfatreduzierern oder Gärern nach einem anderen, bisher völlig unbekannten Mechanismus erfolgen. Diese Annahme wird unterstützt durch die Beobachtung, daß Sulfatreduzierer Selen und Molybdän für das Wachstum auf aromatischen Substanzen benötigen. Wir untersuchen die Schlüsselreaktion im Benzoatstoffwechsel des Gram-negativen Desulfococcus multivorans und in einer neu-isolierten Gram-positiven, thermophilen Desulfotomaculum-Art. Zu Beginn werden biochemische Untersuchungen zur Produktbildung aus [Ring-13/14C]-markiertem Benzoat mit HPLC-, Massenspektrometrie- und NMR-Techniken durchgeführt. Die Experimente werden zunächst mit Zellextrakten durchgeführt; langfristig ist eine Anreicherung/Reinigung des ringreduzierenden Enzyms geplant. Zur Identifizierung von Benzoat-induzierten, Se- und Mo-haltigen Enzymen werden beide Sulfatreduzierer auf Benzoat und auf nicht-aromatischen Substraten mit 75Se-Selenit und/oder 99Mo-Molybdat kultiviert. Nach zweidimensionaler gelelektrophoretischer Auftrennung werden Benzoat-induzierte/radioaktiv markierte Proteine N-terminal ansequenziert, was die Konstruktion von Gensonden zum Durchsuchen von geeigneten DNA-Banken ermöglicht.