水稻卷叶基因rl-8(t)的克隆及功能分析

本研究以单一T-DNA插入产生的水稻卷叶突变体IL39为研究材料，已经运用反向PCR获得了插入位点的旁邻DNA序列，网络分析比对获得了水稻卷叶基因rl-8(t)的BAC克隆,利用RT-PCR获得了cDNA。利用网络资源初步分析了该基因功能，与拟南芥两个未知功能的基因同源。在此研究基础上，运用5'和3'RACE技术去获得rl-8(t)基因的全长cDNA。由于T-DNA插入激活了rl-8(t)的表达，采取两种方法进行功能验证：(1)以部分cDNA片段来构建RNAi质粒Ubi-rl-8(t)，转化卷叶纯合体IL39植株使其叶片恢复正常或卷叶程度减轻；(2)以全长cDNA来构建超表达质粒Ubi::rl-8(t)，转化中花11植株产生卷叶表型。挖掘和克隆具有自主知识产权的水稻卷叶基因rl-8(t)，探明叶片发育和株型形成的机理，为利用水稻叶形基因资源进行水稻品种的改良和构建水稻理想株型提供理依据。