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中医㨰法样刺激对损伤骨骼肌细胞机械敏感通路触发机制研究

批准号:
82074572
项目类别:
面上项目
资助金额:
55.0 万元
负责人:
张宏
依托单位:
学科分类:
推拿按摩学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
张宏

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
体内细胞如何识别手法作用力的改变,并将手法特有的力学信号转变为电生理及化学信号,进而引起一系列生物学效应,是阐述手法作用机制的关键环节。本项目将联合美国北德克萨斯大学健康科学中心,通过Flexcell细胞力学加载系统开展㨰法样刺激对损伤骨骼肌细胞机械敏感通路触发机制研究。应用高通量转录组学与蛋白组学联合技术及膜片钳技术分别筛选力感受器途径和力敏感离子通道途径;重新培养损伤骨骼肌细胞,对筛选出的可能传导通路加以阻断,在力学加载后检测骨骼肌细胞凋亡、超微结构及肌酸磷酸激酶等代谢指标的应答状况,探究该通路是否为㨰法样刺激由力学信号转换为电生理及化学信号的转导途径。该研究将阐释推拿手法生物学效应启动环节的信号转导规律,为推拿手法的作用机制提供理论依据和实践资料。
英文摘要
It is a key link in the study of manipulation mechanism how the cells in the body identify the change of manipulation force, and then translate these characteristic mechanics signal into the physical and chemical signal which results in a series of biological effects. Collaborating with University of North Texas Health Science Center, the project will study on trigger mechanism of mechanical sensitive pathway of injured skeletal muscle cells by Chinese rolling manipulation-like stimulation with the Flexcell cellular mechanical loading system. The force receptor pathway and force sensitive ion channel way will be screened by the techniques of high throughput transcriptome and proteomics and patch clamp respectively. After the Flexcell cellular mechanical loading, the skeletal muscle apoptosis, ultrastructure and metabolic indicators such as CK will be tested after the injured skeletal muscle cells are loaded the mechanical stimulation imitating Rolling Manipulation when the possible screened pathways are blocked, which verify the validity of transduction pathways converting mechanical signal to electrical physiological and chemical signal.The study will explain the signal transduction law initiating the biological effect of Chinese manipulation, which provides the theoretical basis and practical information for the mechanism of manipulation in Traditional Chinese Medicine.
主要研究内容:本研究模拟临床中医推拿㨰法操作,采集㨰法压力、频率、时间参数;采用FX-5000™细胞力学加载系统拟合㨰法压力--时间曲线。以细胞增殖、细胞代谢物、细胞超微结构为指标,建立骨骼肌细胞机械损伤模型。通过细胞增殖、细胞代谢物、细胞超微结构、钙稳态、细胞周期共同验证㨰法样刺激对机械损伤骨骼肌细胞的修复作用。通过转录组联合蛋白组学筛选㨰法样刺激修复骨骼肌细胞的关键信号通路并进行验证。使用钙成像技术研究㨰法样刺激对损伤骨骼肌细胞力敏感离子通道的影响。通过sh-RNA技术对关键通路进行阻断验证。.重要结果及关键数据:本研究使用1MPa压强、2小时持续加压、每天重复加压3天的机械损伤模型,成功地模拟了骨骼肌细胞在受力后的生理反应。实验结果显示,这种机械损伤模式显著加剧细胞氧化应激和促进细胞早期凋亡现象,验证了机械损伤模型的有效性。通过转录组和蛋白组学的综合分析,确定了整合素β1-FAK通路作为㨰法样刺激的关键机械敏感信号通路。实验显示该通路的激活可促进骨骼肌细胞增殖、重组细胞骨架,推动细胞周期进展,显著促进机械损伤后的细胞修复过程。此外,钙离子成像技术揭示了机械损伤引起的骨骼肌细胞内钙离子紊乱,而㨰法样刺激通过促进钙离子外排,有效降低了细胞内钙离子浓度,促进了细胞的修复。ITGB1的敲减实验证实了整合素β1-FAK通路在这一过程中的关键作用,其缺失显著削弱了㨰法样刺激的生物效应。.科学意义:本研究通过体外模型全面证实了中医㨰法样刺激促进骨骼肌修复的科学有效性,揭示了其通过整合素β1-FAK通路调控细胞骨架重组、细胞周期进程及钙稳态的精确分子机制。我们创新性地构建了细胞机械损伤模型,并通过多组学分析,系统阐明了机械力通过力敏感离子通道转导信号的复杂生物学规律。这些成果不仅为推拿的标准化操作提供了坚实的理论基础,而且显著拓宽了力学微环境调控在损伤修复及再生医学中的应用视野,推动了传统手法治疗与现代康复技术的深度融合,为中医推拿的现代化和科学认证提供了实证基础。
中药苦荞头有效成分Tatariside F靶向MZF1/lncRNA HClnc1/ODC1通路抗肝癌的分子机制研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    张宏
  • 依托单位:
基于细胞热转移分析技术的蔓荆呋喃诱导宫颈癌细胞凋亡分子靶点研究
  • 批准号:
    81773941
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2017
  • 负责人:
    张宏
  • 依托单位:
中医滚法样刺激对损伤骨骼肌细胞机械信号传导通路的影响
  • 批准号:
    81574095
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    59.0万元
  • 批准年份:
    2015
  • 负责人:
    张宏
  • 依托单位:
基于细胞生物力学的手法模拟实验平台构建及滚法对损伤骨骼肌细胞Ca2+通道的调控研究
  • 批准号:
    81173359
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    57.0万元
  • 批准年份:
    2011
  • 负责人:
    张宏
  • 依托单位:
国内基金
海外基金