课题基金 / 基金详情

罗非鱼NCC表面凝聚素受体的鉴定与功能研究

批准号:
32073006
项目类别:
面上项目
资助金额:
58.0 万元
负责人:
简纪常
依托单位:
学科分类:
水产生物免疫学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
简纪常

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
鱼类非特异性细胞毒性细胞(Nonspecific cytotoxic cell,NCC)的功能相似于高等脊椎动物的自然杀伤细胞(Natural Killer Cell,NK)。NK细胞表面受体分子类型、功能、活性调控业已研究清楚。但除NCCRP-1外,NCC表面其它受体分子的研究尚为鲜见,制约了对NCC功能及其活性调控的全面认知。因此,本课题应用单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术获得了罗非鱼头肾总淋巴细胞表达图谱及NCC表面的4个凝聚素受体,将开展4个凝聚素受体的类型(激活型或抑制型)鉴定与定位、分子特征的分析、凝聚素受体相互作用蛋白的筛选与功能验证以及凝聚素受体介导NCC活性调控机制的研究,从而阐明NCC表面凝聚素受体对NCC功能影响的重要性。研究结果为揭示鱼类NCC免疫监视功能的分子机理提供重要的科学理论依据,对鱼类NCC表面受体分子的挖掘与功能研究具有重要的科学意义。
英文摘要
Functions of nonspecific cytotoxic cell (NCC) in fish are similar to those of natural killer cell (NK cell) in higher vertebrate. It is well known for the type, function and regulation of surface receptors on NK cell, but those of NCC surface receptors are less known, which restrict to overall know the NCC function and regulation on NCC activation. Therefore this project team has obtained tilapia NCC expression map and four surface lectin receptors on NCC based on single cell sequencing technique for NCC, and then will identify the type of the four lectin receptors which belong to activating receptor or inhibitory receptor, locate the four lectin receptors in or on NCC, and analyze molecular characteristics of the four receptors, select the interacting proteins with the four receptors and verify the functions of the interacting proteins, and analyze the regulation mechanism of NCC activation mediated by the lectin receptors and elucidate the significance of the lecin receptors on the NCC function. The results of this project will provide important scientific theoretic basis for revealing molecular mechanism on immune surveillance of NCC, and have important scientific significance on the rediscovery of the surface receptors on NCC and the studies on the receptors functions.
本项目以罗非鱼为研究对象,聚焦其非特异性细胞毒性细胞(NCC)表面的凝集素受体分子,旨在解析这些受体在免疫反应中的功能及其调控机制。项目历时四年,按计划完成了预定研究目标,并取得了重要研究成果。项目背景源于罗非鱼作为我国重要水产养殖品种所面临的病害频发问题,这些问题严重影响了养殖效益。NCC作为硬骨鱼类重要的免疫细胞,在抗病过程中发挥关键作用。因此,本项目通过对罗非鱼NCC表面凝集素受体分子的研究,探索其在免疫识别与调控中的功能,为鱼类免疫学研究提供理论支持。项目团队对罗非鱼头肾淋巴细胞单细胞图谱进行校正,筛选出CD209、Hepatic lectin、CLEC12B和Siglec7四个特异性表达于NCC表面的凝集素受体分子,完成了其基因克隆与序列分析,并构建了原核和真核表达载体,获得重组活性蛋白。通过体外功能实验,研究了这些受体对病原菌的结合、凝集活性及其对NCC活性的调控机制。此外,利用酵母双杂交技术筛选出潜在互作蛋白,并对其功能进行了验证。项目取得了一系列重要结果:首先,明确了CD209为激活性受体,通过NF-κB信号通路调控NCC的杀伤活性;而Hepatic lectin、CLEC12B和Siglec7为抑制性受体,分别通过NF-κB、MAPK、JAK-STAT等信号通路调控NCC活性。其次,发现了CD209的潜在互作蛋白CD80/86和Transferrin,Hepatic lectin的互作蛋白Ribosomal protein S6,以及CLEC12B的互作蛋白Sequestosome 1。这些互作蛋白可显著调控NCC效应分子的表达和杀伤活性。此外,还明确了NCC表面凝集素受体在不同病原刺激下的表达特征及其对炎症因子、细胞凋亡和焦亡因子的调控作用。本项目的研究成果具有重要的科学意义。它系统解析了罗非鱼NCC表面凝集素受体的功能及其调控机制,揭示了其在天然免疫中的重要作用,为理解鱼类免疫系统提供了新的视角。这些发现不仅为培育抗病力强的罗非鱼品种提供了理论依据,也为硬骨鱼类疾病防治和养殖技术优化提供了科学指导。此外,项目还培养了多名研究生,提升了团队的科研能力,推动了鱼类免疫学领域的发展。
罗非鱼NCC内JAK-STAT信号传导及其介导NCC活性调控
  • 批准号:
    32573551
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    50.00万元
  • 批准年份:
    2025
  • 负责人:
    简纪常
  • 依托单位:
北部湾海水养殖鱼类弧菌病流行规律、病原诊断及致病机理研究
  • 批准号:
    U20A2065
  • 项目类别:
    联合基金项目
  • 资助金额:
    259.0万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    简纪常
  • 依托单位:
鱼类NCCRP-1介导的NCC活性调控机理研究
  • 批准号:
    31572651
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    64.0万元
  • 批准年份:
    2015
  • 负责人:
    简纪常
  • 依托单位:
鱼类母源抗体垂直转移机理的研究
  • 批准号:
    30471337
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    19.0万元
  • 批准年份:
    2004
  • 负责人:
    简纪常
  • 依托单位:
国内基金
海外基金