Packaging specific segments of the Salmonella chromosome with locked-in Mud-P22 prophages.
Packaging specific segments of the Salmonella chromosome with locked-in Mud-P22 prophages.
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用锁定的 Mud-P22 前噬菌体包装沙门氏菌染色体的特定片段。
DOI：
10.1093/genetics/118.4.581
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发表时间：
1988
期刊：
影响因子：
3.3
通讯作者：
Elliott,T
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Youderian,P;Sugiono,P;Brewer,KL;Higgins,NP;Elliott,T
杂交遗传元件 Mud-P 和 Mud-Q（统称为 Mud-P22）已被构建，其携带夹在转座子 Mu 末端之间的温带沙门氏菌噬菌体 P22 基因组的三分之二。将这些元件插入沙门氏菌染色体中会产生无法切除的锁定 P22 前噬菌体。诱导后（由于 P22 c2 阻遏蛋白失活），锁定的原噬菌体原位复制其 DNA，导致染色体邻近区域的扩增，并从 P22 包装位点 pac 沿一个方向持续包装三个连续的相邻 DNA 头。 Mud-P22 溶原的诱导裂解物中的噬菌体颗粒含有与原噬菌体插入位点附近几分钟的染色体 DNA 相对应的 DNA 分子，并高效转导附近的遗传标记。 Mud-P22 前噬菌体已通过转座引入 F' 附加体中；沙门氏菌染色体上的驻留 Mud 插入可通过 P22 介导的转导杂交中的同源重组转化为 Mud-P22 插入。
Hybrid genetic elements, Mud-P and Mud-Q (collectively, Mud-P22s), have been constructed that carry two-thirds of the temperate Salmonella phage P22 genome sandwiched between the ends of transposon Mu. Insertions of these elements in the Salmonella chromosome generate locked-in P22 prophages that cannot excise. Upon induction (as a consequence of the inactivation of P22 c2 repressor), a locked-in prophage replicates its DNA in situ, resulting in the amplification of neighboring regions of the chromosome and the processive packaging of three contiguous headsful of adjacent DNA in one direction from the P22 packaging site, pac. Phage particles in an induced lysate of a Mud-P22 lysogen contain DNA molecules corresponding to several minutes of chromosomal DNA adjacent to the site of prophage insertion and transduce nearby genetic markers with high efficiencies. Mud-P22 prophages have been introduced into an F' episome by transposition; resident Mud insertions on the Salmonella chromosome may be converted to Mud-P22 insertions by homologous recombination in P22-mediated transductional crosses.
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