Protocol for in vivo and in vitro study of lymphatic valve formation driven by shear stress signaling pathway.
Protocol for in vivo and in vitro study of lymphatic valve formation driven by shear stress signaling pathway.
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DOI：
10.1016/j.xpro.2023.102141
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发表时间：
2023-04-17
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Yang, Ying
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Banerjee, Richa;Knauer, Luz A.;Yang, Ying
在这里，我们详细介绍了一个协议的淋巴富集组织的小鼠模型的免疫染色和定量的淋巴阀，血管长度和血管直径的目的的分离和处理。此外，我们描述了一个优化的协议，暴露处理的人真皮淋巴管内皮细胞流动的目的，通过基因表达和蛋白质检测方法研究淋巴切应力反应。这种方法是有用的，以研究淋巴阀的形成驱动的振荡剪应力。有关本方案使用和执行的完整详细信息，请参见Scallan et al.（2021年）。收集富含淋巴管的组织的详细步骤使用离体成像对淋巴管和瓣膜进行形态学分析瓣膜数量、血管长度和血管直径精确定量的步骤研究培养的人淋巴管内皮细胞中的流动反应的步骤出版商说明：进行任何实验方案都需要遵守当地机构的实验室安全和伦理指南。在这里，我们详细介绍了一个协议的淋巴富集组织的小鼠模型的免疫染色和定量的淋巴阀，血管长度和血管直径的目的的分离和处理。此外，我们描述了一个优化的协议，暴露处理的人真皮淋巴管内皮细胞流动的目的，通过基因表达和蛋白质检测方法研究淋巴切应力反应。这种方法是有用的，以研究淋巴阀的形成驱动的振荡剪应力。
Here we detail a protocol for the isolation and processing of lymphatic enriched tissue of mouse models for the purpose of immunostaining and quantification of lymphatic valves, vessel length, and vessel diameter. Furthermore, we describe an optimized protocol for exposing treated human dermal lymphatic endothelial cells to flow for the purpose of studying lymph shear stress responses via gene expression and protein detection methods. This approach is useful to study lymphatic valve formation driven by oscillatory shear stress. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Scallan et al. (2021). Detailed steps for harvesting lymphatic vessel enriched tissues Morphological analysis of lymphatic vessels and valves using ex vivo imaging Steps for precise quantification of valve number, vessel length, and vessel diameter Steps for investigating flow responses in cultured human lymphatic endothelial cells Publisher’s note: Undertaking any experimental protocol requires adherence to local institutional guidelines for laboratory safety and ethics. Here we detail a protocol for the isolation and processing of lymphatic enriched tissue of mice models for the purpose of immunostaining and quantification of lymphatic valves, vessel length, and vessel diameter. Furthermore, we describe an optimized protocol for exposing treated human dermal lymphatic endothelial cells to flow for the purpose of studying lymph shear stress responses via gene expression and protein detection methods. This approach is useful to study lymphatic valve formation driven by oscillatory shear stress.
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影响因子：
15.9
作者：
Bazigou, Eleni;Lyons, Oliver T. A.;Makinen, Taija
通讯作者：
Makinen, Taija
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作者：
Cha B;Geng X;Mahamud MR;Fu J;Mukherjee A;Kim Y;Jho EH;Kim TH;Kahn ML;Xia L;Dixon JB;Chen H;Srinivasan RS
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影响因子：
15.9
作者：
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Yang, Ying
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20.3
作者：
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Hong, Young-Kwon
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作者：
Yang, Ying;Cha, Boksik;Scallan, Joshua P.
通讯作者：
Scallan, Joshua P.