In vivo imaging of Caenorhabditis elegans glycans.
In vivo imaging of Caenorhabditis elegans glycans.
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DOI：
10.1021/cb900254y
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发表时间：
2009-12-18
影响因子：
4
通讯作者：
Bertozzi, Carolyn R.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Laughlin, Scott T.;Bertozzi, Carolyn R.
秀丽隐杆线虫是研究多糖动力学的一个极好的模式生物，这一目标需要在体内对多糖进行成像的工具。本研究应用生物正交化学报告技术对活的秀丽隐杆线虫黏液型o -聚糖进行分子成像。我们用n -乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）、n -乙酰半乳糖胺（GalNAc）和n -乙酰甘露糖胺（ManNAc）的叠氮糖变体处理蠕虫，导致它们的细胞表面聚糖被叠氮化合物代谢标记。随后，将虫体与荧光基团共轭二氟化环环（DIFO）试剂进行无铜咔嗒反应。我们发现黏液蛋白在所有四个幼虫阶段的咽、雌雄同体成虫的咽、外阴和肛门以及成虫的尾巴中都有明显的定位。使用多色，时间分辨成像策略，我们发现聚糖的分布和动态在解剖学上和发育阶段有所不同。
The nematode Caenorhabditis elegans is an excellent model organism for studies of glycan dynamics, a goal that requires tools for imaging glycans in vivo. Here we applied the bioorthogonal chemical reporter technique for the molecular imaging of mucin-type O-glycans in live C. elegans. We treated worms with azidosugar variants of N-acetylglucosamine (GlcNAc), N-acetylgalactosamine (GalNAc), and N-acetylmannosamine (ManNAc), resulting in the metabolic labeling of their cell-surface glycans with azides. Subsequently, the worms were reacted via copper-free click reaction with fluorophore-conjugated difluorinated cyclooctyne (DIFO) reagents. We identified prominent localization of mucins in the pharynx of all four larval stages, in the adult hermaphrodite pharynx, vulva and anus, and in the tail of the adult male. Using a multicolor, time-resolved imaging strategy, we found that the distribution and dynamics of the glycans varied anatomically and with respect to developmental stage.
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DOI：
10.1073/pnas.0811481106
发表时间：
2009-01-06
影响因子：
11.1
作者：
Laughlin, Scott T.;Bertozzi, Carolyn R.
通讯作者：
Bertozzi, Carolyn R.
影响因子：
64.8
作者：
Mizuguchi, S;Uyama, T;Nomura, K
通讯作者：
Nomura, K
影响因子：
3.9
作者：
Yakubov, Gleb E.;Mccoll, James;Ramsden, Jeremy J.
通讯作者：
Ramsden, Jeremy J.
影响因子：
4.8
作者：
Kawar, ZS;Van Die, I;Cummings, RD
通讯作者：
Cummings, RD
影响因子：
3.2
作者：
Luchansky, SJ;Goon, S;Bertozzi, CR
通讯作者：
Bertozzi, CR