Illuminating endosomal escape of polymorphic lipid nanoparticles that boost mRNA delivery.
Illuminating endosomal escape of polymorphic lipid nanoparticles that boost mRNA delivery.
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DOI：
10.1039/d0bm01947j
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发表时间：
2021-06-15
影响因子：
6.6
通讯作者：
Sahay G
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Herrera M;Kim J;Eygeris Y;Jozic A;Sahay G
以脂质为基础的纳米粒(LNPs)用于传递mRNA，已经跃居非病毒基因传递的前沿。尽管有这一令人兴奋的进展，但LNP细胞进入后糟糕的内体逃逸仍然是一个尚未解决的限速瓶颈。在这里，我们报告使用Galectin 8-GFP(Gal8-GFP)细胞报告系统来可视化LNP包裹的mRNA的内体逃逸能力。用植物类固醇取代胆固醇的LNPs在Gal8-GFP报告系统中表现出不同程度的Gal8募集。在活细胞成像中，含有β-谷甾醇的LNP-SITO的结果显示，与标准胆固醇LNPs(LNP-CHOL)相比，可检测到的内体扰动事件增加了10倍，这表明LNP-SITO具有优越的逃脱内体包裹的能力。对这些LNPs的转运研究表明，这些LNPs与晚期内小体有很强的定位。这种高度敏感和强大的Gal8-GFP报告系统可能是一个宝贵的工具，可以用来阐明复杂的LNP贩运和短暂的内体逃逸事件，从而使基因传递方面的进展成为可能。
Lipid-based nanoparticles (LNPs) for the delivery of mRNA have jumped to the forefront of non-viral gene delivery. Despite this exciting development, poor endosomal escape after LNP cell entry remains an unsolved, rate-limiting bottleneck. Here we report the use of a galectin 8-GFP (Gal8-GFP) cell reporter system to visualize the endosomal escape capabilities of LNP-encapsulated mRNA. LNPs substituted with phytosterols in place of cholesterol exhibited various levels of Gal8 recruitment in the Gal8-GFP reporter system. In live-cell imaging, the results of the LNPs containing β-sitosterol (LNP-Sito) showed a 10-fold increase in detectable endosomal perturbation events when compared to the standard cholesterol LNPs (LNP-Chol), suggesting the superior capability of LNP-Sito to escape from endosomal entrapment. Trafficking studies of these LNPs showed strong localization with late endosomes. This highly sensitive and robust Gal8-GFP reporter system can be a valuable tool to elucidate intricacies of LNP trafficking and ephemeral endosomal escape events, enabling advancements in gene delivery.
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影响因子：
5.7
作者：
Mansilla Pareja ME;Bongiovanni A;Lafont F;Colombo MI
通讯作者：
Colombo MI
影响因子：
46.9
作者：
Gilleron, Jerome;Querbes, William;Zerial, Marino
通讯作者：
Zerial, Marino
影响因子：
158.5
作者：
Balwani, Manisha;Sardh, Eliane;Gouya, Laurent
通讯作者：
Gouya, Laurent
影响因子：
16.6
作者：
Jayaraman, Muthusamy;Ansell, Steven M.;Mui, Barbara L.;Tam, Ying K.;Chen, Jianxin;Du, Xinyao;Butler, David;Eltepu, Laxman;Matsuda, Shigeo;Narayanannair, Jayaprakash K.;Rajeev, Kallanthottathil G.;Hafez, Ismail M.;Akinc, Akin;Maier, Martin A.;Tracy, Mark A.;Cullis, Pieter R.;Madden, Thomas D.;Manoharan, Muthiah;Hope, Michael J.
通讯作者：
Hope, Michael J.
DOI：
10.1007/978-1-4939-1396-1_1
发表时间：
2015
期刊：
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
影响因子：
--
作者：
Arthur CM;Baruffi MD;Cummings RD;Stowell SR
通讯作者：
Stowell SR