Single-synapse analysis of a diverse synapse population: proteomic imaging methods and markers.
Single-synapse analysis of a diverse synapse population: proteomic imaging methods and markers.
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DOI：
10.1016/j.neuron.2010.09.024
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发表时间：
2010-11-18
期刊：
影响因子：
16.2
通讯作者：
Smith, Stephen J.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Micheva, Kristina D.;Busse, Brad;Weiler, Nicholas C.;O'Rourke, Nancy;Smith, Stephen J.
迄今为止，缺乏原位测量单个突触蛋白质组成的方法阻碍了突触分子多样性的探索和利用。在这里，我们描述了使用阵列断层扫描，一种新的高分辨率蛋白质组学成像方法，来确定Line-H-YFP Thy-1转基因小鼠体感觉皮层中谷氨酸和GABA突触的组成。我们发现几乎所有的突触都能被突触前磷酸化蛋白synapsin I的抗体识别，而针对其他16种突触蛋白的抗体则能区分谷氨酸能突触和gaba能突触的4种亚型。YFP- h小鼠细胞系中细胞特异性的YFP表达允许突触被分配到特定的突触前和突触后伙伴，并揭示了第5层锥体细胞上的一个棘亚群接受vglut1亚型谷氨酸能和gaba能突触输入。这些结果建立了一种高通量获取单个皮层突触原位蛋白质组学数据的方法。
A lack of methods for measuring the protein compositions of individual synapses in situ has so far hindered the exploration and exploitation of synapse molecular diversity. Here we describe the use of array tomography, a new high-resolution proteomic imaging method, to determine the composition of glutamate and GABA synapses in somatosensory cortex of Line-H-YFP Thy-1 transgenic mice. We find that virtually all synapses are recognized by antibodies to the presynaptic phosphoprotein synapsin I, while antibodies to 16 other synaptic proteins discriminate amongst 4 subtypes of glutamatergic synapses and GABAergic synapses. Cell-specific YFP expression in the YFP-H mouse line allows synapses to be assigned to specific presynaptic and postsynaptic partners and reveals that a subpopulation of spines on layer 5 pyramidal cells receives both VGluT1-subtype glutamatergic and GABAergic synaptic inputs. These results establish a means for the high-throughput acquisition of proteomic data from individual cortical synapses in situ.
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影响因子：
5.3
作者：
Gronborg, Mads;Pavlos, Nathan J.;Jahn, Reinhard
通讯作者：
Jahn, Reinhard
影响因子：
5.3
作者：
Kielland, Anders;Erisir, Alev;Heggelund, Paul
通讯作者：
Heggelund, Paul
DOI：
10.1098/rstb.1999.0378
发表时间：
1999-02-28
期刊：
PHILOSOPHICAL TRANSACTIONS OF THE ROYAL SOCIETY OF LONDON SERIES B-BIOLOGICAL SCIENCES
影响因子：
--
作者：
Hilfiker, S;Pieribone, VA;Greengard, P
通讯作者：
Greengard, P
影响因子：
16.2
作者：
Fremeau, RT;Troyer, MD;Edwards, RH
通讯作者：
Edwards, RH
影响因子：
9.8
作者：
Anderson JR;Jones BW;Yang JH;Shaw MV;Watt CB;Koshevoy P;Spaltenstein J;Jurrus E;U V K;Whitaker RT;Mastronarde D;Tasdizen T;Marc RE
通讯作者：
Marc RE