A New Method for Gene Deletion to Investigate Cell Wall Biogenesis in Fusobacterium nucleatum.
A New Method for Gene Deletion to Investigate Cell Wall Biogenesis in Fusobacterium nucleatum.
复制标题
一种研究具核梭杆菌细胞壁生物发生的基因删除新方法。
DOI：
10.1007/978-1-0716-3491-2_6
复制
发表时间：
2024
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Wu,Chenggang
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Bibek,GC;Zhou,Peng;Wu,Chenggang
受控的隔膜肽聚糖水解对于细菌细胞分裂、保持细胞完整性并促进正确的子细胞分离至关重要。在大肠杆菌中，FtsEX ABC 系统通过调节 EnvC 激活剂来控制细胞壁水解酶的激活。然而，人们对革兰氏阴性口腔细菌具核梭杆菌的细胞分裂过程知之甚少，这主要是由于其众所周知的遗传难题。在此，我们提供了一种新的基因删除方法 inF 的分步程序。 nucleatum，专注于 theftsXgene 作为目标。这种新颖的方法利用了 HicAB 毒素-抗毒素系统，使用 HicA 作为反选择标记来实现高效、精确的基因删除。通过实施这项技术，我们成功地证明了其在 F 中的适用性。 nucleatum，为这种重要微生物的细胞分裂过程提供了新的见解。此外，这种先进的基因删除技术为未来研究参与细胞壁生物发生的基因的功能特征提供了宝贵的资源。有核细胞和其他遗传上难以控制的微生物。
Controlled septal peptidoglycan hydrolysis is vital for bacterial cell division, preserving cellular integrity and facilitating proper daughter cell separation. InEscherichia coli, the FtsEX ABC system governs cell wall hydrolase activation by regulating the EnvC activator. However, the processes underlying cell division in the Gram-negative oral bacteriumFusobacterium nucleatumare poorly understood, mainly due to its well-known genetic intractability. Herein, we provide a step-by-step procedure for a new gene deletion method inF. nucleatum, focusing on theftsXgene as a target. This novel approach exploits the HicAB toxin-antitoxin system, using HicA as a counter-selective marker to enable efficient and precise gene deletion. By implementing this technique, we successfully demonstrated its applicability inF. nucleatum, providing new insights into this important microorganism’s cell division process. Furthermore, this advanced gene deletion technique offers a valuable resource for future investigation into the functional characterization of genes involved in cell wall biogenesis inF. nucleatumand other genetically intractable microorganisms.
登录
查看更多内容
影响因子：
--
作者：
G. Pfeifer;A. Riggs
通讯作者：
G. Pfeifer;A. Riggs
影响因子：
64.5
作者：
MULLNER, EW;KUHN, LC
通讯作者：
KUHN, LC
转录和转录后机制对小鼠红白血病细胞 c-myc 表达调节的贡献。
影响因子：
10.5
作者：
Nepveu,A;Marcu,KB;Skoultchi,AI;Lachman,HM
通讯作者：
Lachman,HM
微管蛋白表达的自动调节是通过多聚体微管蛋白 mRNA 的特异性降解来实现的
影响因子：
64.5
作者：
J. Pachter;T. Yen;D. Cleveland
通讯作者：
D. Cleveland
胰岛素和佛波酯激活 3T3-L1 细胞中的 S6 激酶活性。
DOI：
10.1073/pnas.82.13.4369
发表时间：
1985
影响因子：
11.1
作者：
Tabarini,D;Heinrich,J;Rosen,OM
通讯作者：
Rosen,OM