Ligand-directed labeling of opioid receptors for covalent attachment of fluorophores or small-molecule probes.
Ligand-directed labeling of opioid receptors for covalent attachment of fluorophores or small-molecule probes.
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DOI：
10.1016/j.xpro.2023.102231
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发表时间：
2023-04-26
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Arttamangkul, Seksiri
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Adoff, Hayden;Halls, Victoria S.;Holland, Emily;Lobingier, Braden;Arttamangkul, Seksiri
该方案描述了使用配体导向试剂纳洛酮胺-酰基咪唑化合物（NAI-X）对阿片受体（OR）进行内源性标记。NAI通过引导和永久标记小分子报告分子（X）（如荧光团或生物素）来发挥作用。在这里，我们详细的合成和使用NAI-X的OR可视化和功能研究。NAI-X化合物克服了在绘制和追踪内源性OR方面的长期挑战，因为标记可以在活组织或培养细胞中原位完成。有关本方案使用和执行的完整详细信息，请参见Arttamangkul等人。使用化学方法标记阿片受体标记试剂的化学合成标记异源细胞系中阿片受体的标记啮齿动物脑切片中内源性阿片受体的可视化出版商说明：进行任何实验方案都需要遵守当地机构的实验室安全和伦理指南。该方案描述了使用配体导向试剂纳洛酮胺-酰基咪唑化合物（NAI-X）对阿片受体（OR）进行内源性标记。NAI通过引导和永久标记小分子报告分子（X）（如荧光团或生物素）来发挥作用。在这里，我们详细的合成和使用NAI-X的OR可视化和功能研究。NAI-X化合物克服了在绘制和追踪内源性OR方面的长期挑战，因为标记可以在活组织或培养细胞中原位完成。
This protocol describes endogenous labeling of opioid receptors (ORs) using a ligand-directed reagent, naltrexamine-acylimidazole compounds (NAI-X). NAI acts by guiding and permanently tagging a small-molecule reporter (X)—such as fluorophores or biotin—to ORs. Here we detail syntheses and uses of NAI-X for OR visualization and functional studies. The NAI-X compounds overcome long-standing challenges in mapping and tracking endogenous ORs as the labeling can be done in situ with live tissues or cultured cells. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Arttamangkul et al. Fluorescently labeling of opioid receptors using a chemical approach Chemical synthesis of the labeling reagent Labeling of opioid receptors in heterologous cell lines Visualization of endogenous opioid receptors in rodent brain slices Publisher’s note: Undertaking any experimental protocol requires adherence to local institutional guidelines for laboratory safety and ethics. This protocol describes endogenous labeling of opioid receptors (ORs) using a ligand-directed reagent, naltrexamine-acylimidazole compounds (NAI-X). NAI acts by guiding and permanently tagging a small-molecule reporter (X)—such as fluorophores or biotin—to ORs. Here we detail syntheses and uses of NAI-X for OR visualization and functional studies. The NAI-X compounds overcome long-standing challenges in mapping and tracking endogenous ORs as the labeling can be done in situ with live tissues or cultured cells.
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