Single-cell and population NF-κB dynamic responses depend on lipopolysaccharide preparation.
Single-cell and population NF-κB dynamic responses depend on lipopolysaccharide preparation.
复制标题
单细胞和种群NF-κB动态反应取决于脂多糖的制备。
DOI：
10.1371/journal.pone.0053222
复制
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Covert MW
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Gutschow MV;Hughey JJ;Ruggero NA;Bajar BT;Valle SD;Covert MW
内毒素存在于革兰氏阴性菌的外膜，通过TLR4引起转录因子家族核因子-κB的强烈反应。然而，细胞对内毒素的反应因来源和配体的制备而异。我们的目标是比较单细胞NF-κB在不同来源和不同浓度的脂多糖中的动态变化。利用活细胞荧光显微镜，我们测定了成百上千个表达p65-dsRed融合蛋白的单细胞的NF-κB激活动力学。我们使用计算机图像分析来测量随着时间的推移融合蛋白在细胞中的核定位。三种大肠杆菌脂多糖制剂的浓度范围高达九个数量级。我们发现，即使考虑到效力的差异，脂多糖制剂也会引起显著不同的反应。我们还发现，可溶性肿瘤坏死因子受体影响NF-κB动力学的能力在三种制剂中有显著差异。我们的工作有力地表明，细胞对内毒素的反应对配体的来源和制备高度敏感。因此，我们警告说，使用一种制剂的实验得出的结论可能不适用于总体上的内毒素。
Lipopolysaccharide (LPS), found in the outer membrane of gram-negative bacteria, elicits a strong response from the transcription factor family Nuclear factor (NF)-κB via Toll-like receptor (TLR) 4. The cellular response to lipopolysaccharide varies depending on the source and preparation of the ligand, however. Our goal was to compare single-cell NF-κB dynamics across multiple sources and concentrations of LPS. Using live-cell fluorescence microscopy, we determined the NF-κB activation dynamics of hundreds of single cells expressing a p65-dsRed fusion protein. We used computational image analysis to measure the nuclear localization of the fusion protein in the cells over time. The concentration range spanned up to nine orders of magnitude for three E. coli LPS preparations. We find that the LPS preparations induce markedly different responses, even accounting for potency differences. We also find that the ability of soluble TNF receptor to affect NF-κB dynamics varies strikingly across the three preparations. Our work strongly suggests that the cellular response to LPS is highly sensitive to the source and preparation of the ligand. We therefore caution that conclusions drawn from experiments using one preparation may not be applicable to LPS in general.
登录
查看更多内容
单细胞 NF-kappaB 动力学揭示了数字激活和模拟信息处理。
影响因子：
64.8
作者：
通讯作者：
--
影响因子：
7.3
作者：
Bowen WS;Minns LA;Johnson DA;Mitchell TC;Hutton MM;Evans JT
通讯作者：
Evans JT
影响因子：
7.3
作者：
Lee, Timothy K.;Denny, Elissa M.;Covert, Markus W.
通讯作者：
Covert, Markus W.
影响因子：
3
作者：
Erridge, C;Pridmore, A;Poxton, IR
通讯作者：
Poxton, IR
LPS重塑是细菌进化的生存策略
DOI：
10.1073/pnas.1202908109
发表时间：
2012-05-29
影响因子：
11.1
作者：
Li, Yanyan;Powell, Daniel A.;Ernst, Robert K.
通讯作者：
Ernst, Robert K.