Direct N- or C-Terminal Protein Labeling Via a Sortase-Mediated Swapping Approach.
Direct N- or C-Terminal Protein Labeling Via a Sortase-Mediated Swapping Approach.
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DOI：
10.1021/acs.bioconjchem.1c00442
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发表时间：
2021-11-17
影响因子：
4.7
通讯作者：
Rashidian, Mohammad
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Cong, Min;Tavakolpour, Soheil;Berland, Lea;Glockner, Hannah;Andreiuk, Bohdan;Rakhshandehroo, Taha;Uslu, Safak;Mishra, Shruti;Clark, Louise;Rashidian, Mohammad
位点特异性蛋白标记在生物医学研究和生物技术中具有重要意义。虽然许多方法允许位点特异性蛋白质修饰，但没有一种直接有效的n端蛋白质标记方法。我们介绍了一种新的排序酶介导的交换方法，用于一步位点特异性n末端标记，具有接近定量的产量。我们表明，这种方法可以快速有效地切割和同时标记融合蛋白的N或C端。该方法不需要任何先前的修饰，除了遗传整合的排序酶识别基序。这种新方法为蛋白质工程和位点特异性蛋白质修饰提供了灵活性。
Site-specific protein labeling is important in biomedical research and biotechnology. While many methods allow site-specific protein modification, a straightforward approach for efficient N-terminal protein labeling is not available. We introduce a novel sortase-mediated swapping approach for a one-step site-specific N-terminal labeling with a near-quantitative yield. We show that this method allows rapid and efficient cleavage and simultaneous labeling of the N or C termini of fusion proteins. The method does not require any prior modification beyond the genetic incorporation of the sortase recognition motif. This new approach provides flexibility for protein engineering and site-specific protein modifications.
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