Polymerase chain reaction detection of adenovirus DNA sequences in human lymphocytes

Polymerase chain reaction detection of adenovirus DNA sequences in human lymphocytes
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聚合酶链反应检测人淋巴细胞中腺病毒DNA序列

DOI:
--
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发表时间:
2001
期刊:
影响因子:
--
通讯作者:
A. M. Ventura
A. M. Ventura
中科院分区:
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文献类型:
--
作者:
Aufra Araujo;J. Yokosawa;E. Durigon;A. M. Ventura

文献摘要

参考文献

被引文献

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腺病毒的DNA序列在人类感染中比较常见,主要用于PCR和Southern印迹技术。如果细胞不允许复制腺病毒,则病毒性基因瘤可能持续存在。帕拉有这种现象,我们检测了一种新的DNA腺病毒,并表达了E1 A基因。对51个浮游生物外周鳃球的DNA提取物进行PCR,然后进行“巢式PCR”。孔腺病毒感染率为27例(52.9%)。迈斯在我们这里,新发现的样本中有70.8%的样本分析结果为阳性。为了使E1 A基因的检测具有持久性,可以通过RT-PCR的方法对E1 A基因进行相关分析。结果是负面的。为了最终确定病毒的进化,也为了保存E1 A区域,允许通过PCR直接检测腺病毒序列。A concordância encontrada entre essa analise e a pesquisa帕拉o gene hexon foi de 84%.在人类感染的腺病毒基因瘤中,我们发现了阿尔塔高致病性和持久性,并指出了E1 A的区域差异和持久性应答。我们已经确认E1 A基因的PCR可以检测腺病毒,因此需要使用“巢式PCR”来检测六邻体基因的存在。
Sequencias de DNA de adenovirus sao frequentemente encontradas em linfocitos humanos, tendo sido utilizadas para tal as tecnicas de PCR e "Southern blot". Isto e possivel apesar dessas celulas nao serem permissivas a replicacao de adenovirus, sugerindo persistencia do genoma viral. Para investigar esse fenomeno, procuramos detectar em voluntarios nao sintomaticos DNA adenoviral e expressao do gene E1A. Amostras de DNA obtidas de globulos brancos perifericos de 51 voluntarios, foram submetidas a PCR utilizando oligonucleotideos para uma sequencia conservada do gene hexon, seguindo-se uma "nested PCR". Sequencias de adenovirus foram encontradas em 27 amostras (52,9%). Depois de mais de um ano, novas amostras desses voluntarios positivos foram analisadas e em 70,8% dos casos o resultado foi mantido. Como isto poderia ser devido a persistencia, decidimos verificar se o gene precoce E1A estava relacionado analisando sua expressao atraves de RT-PCR. Os resultados foram negativos para todas as amostras. O par de oligonucleotideos desenvolvido para essa finalidade, que tem como alvo uma regiao conservada em E1A, permitiu detectar sequencias de adenovirus diretamente por PCR. A concordância encontrada entre essa analise e a pesquisa para o gene hexon foi de 84%. Nossos dados sugerem alta ocorrencia e persistencia de genoma adenoviral em linfocitos humanos, e indicam que uma regiao distinta de E1A e responsavel pela persistencia. Podemos tambem afirmar que a PCR para o gene E1A e uma boa opcao quando se quer detectar adenovirus, evitando-se o alto risco de contaminacao da "nested PCR" necessaria para identificar a presenca do gene hexon.
腺病毒E1a的永生化和T24-ras癌基因协同功能的分离。
DOI: --
发表时间: 1988
期刊: Oncogene
影响因子: 8
作者:
Kuppuswamy,M;Subramanian,T;Chinnadurai,G
通讯作者: Chinnadurai,G
HTLV-II x 和腺病毒 E1A 蛋白在转录激活中的功能关系。
DOI: 10.1126/science.2996140
发表时间: 1985
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影响因子: --
作者:
Chen,IS;Cann,AJ;Shah,NP;Gaynor,RB
通讯作者: Gaynor,RB
腺病毒 E1a 突变体沉默人类免疫缺陷病毒长末端重复表达。
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