Polymerase chain reaction detection of adenovirus DNA sequences in human lymphocytes
Polymerase chain reaction detection of adenovirus DNA sequences in human lymphocytes
复制标题
聚合酶链反应检测人淋巴细胞中腺病毒DNA序列
DOI:
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发表时间:
2001
期刊:
影响因子:
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通讯作者:
A. M. Ventura
中科院分区:
文献类型:
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作者:
Aufra Araujo;J. Yokosawa;E. Durigon;A. M. Ventura
Sequencias de DNA de adenovirus sao frequentemente encontradas em linfocitos humanos, tendo sido utilizadas para tal as tecnicas de PCR e "Southern blot". Isto e possivel apesar dessas celulas nao serem permissivas a replicacao de adenovirus, sugerindo persistencia do genoma viral. Para investigar esse fenomeno, procuramos detectar em voluntarios nao sintomaticos DNA adenoviral e expressao do gene E1A. Amostras de DNA obtidas de globulos brancos perifericos de 51 voluntarios, foram submetidas a PCR utilizando oligonucleotideos para uma sequencia conservada do gene hexon, seguindo-se uma "nested PCR". Sequencias de adenovirus foram encontradas em 27 amostras (52,9%). Depois de mais de um ano, novas amostras desses voluntarios positivos foram analisadas e em 70,8% dos casos o resultado foi mantido. Como isto poderia ser devido a persistencia, decidimos verificar se o gene precoce E1A estava relacionado analisando sua expressao atraves de RT-PCR. Os resultados foram negativos para todas as amostras. O par de oligonucleotideos desenvolvido para essa finalidade, que tem como alvo uma regiao conservada em E1A, permitiu detectar sequencias de adenovirus diretamente por PCR. A concordância encontrada entre essa analise e a pesquisa para o gene hexon foi de 84%. Nossos dados sugerem alta ocorrencia e persistencia de genoma adenoviral em linfocitos humanos, e indicam que uma regiao distinta de E1A e responsavel pela persistencia. Podemos tambem afirmar que a PCR para o gene E1A e uma boa opcao quando se quer detectar adenovirus, evitando-se o alto risco de contaminacao da "nested PCR" necessaria para identificar a presenca do gene hexon.
影响因子:
8
作者:
Kuppuswamy,M;Subramanian,T;Chinnadurai,G
通讯作者:
Chinnadurai,G
DOI:
10.1126/science.2996140
发表时间:
1985
期刊:
Science (New York, N.Y.)
影响因子:
--
作者:
Chen,IS;Cann,AJ;Shah,NP;Gaynor,RB
通讯作者:
Gaynor,RB
DOI:
10.1073/pnas.87.4.1310
发表时间:
1990
影响因子:
11.1
作者:
Ventura,AM;Arens,MQ;Srinivasan,A;Chinnadurai,G
通讯作者:
Chinnadurai,G