A simple method for imaging axonal transport in aging neurons using the adult Drosophila wing.
A simple method for imaging axonal transport in aging neurons using the adult Drosophila wing.
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DOI：
10.1038/nprot.2016.112
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发表时间：
2016-09
期刊：
影响因子：
14.8
通讯作者：
Bullock, Simon L.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Vagnoni, Alessio;Bullock, Simon L.
有越来越多的兴趣轴突货物运输和年龄相关的神经元功能障碍之间的联系。研究成年动物神经元中的轴突运输需要活体或离体成像方法，这在脊椎动物模型中是费力且昂贵的。我们描述了简单的，非侵入性的程序，成像货物的运动性轴突内使用感觉神经元的半透明果蝇翅膀。一个关键的方面是安装完整的苍蝇，允许在翅膀神经元的运输详细成像的方法。再加上果蝇中现有的遗传工具，这是一个易于处理的系统，用于研究动物寿命期间的轴突运输，从而表征货物动力学，神经元老化和疾病之间的关系。用于成像的样品的制备需要大约5分钟，每个翼的运输通常拍摄2-3分钟。我们还记录了从所获得的图像中量化传输参数的程序，并描述了该协议如何适用于研究衰老神经元中的其他细胞生物学过程。
There is growing interest in the link between axonal cargo transport and age-associated neuronal dysfunction. Studying axonal transport in neurons of adult animals requires intravital or ex vivo imaging approaches, which are laborious and expensive in vertebrate models. We describe simple, non-invasive procedures for imaging cargo motility within axons using sensory neurons of the translucent Drosophila wing. A key aspect is a method for mounting the intact fly that allows detailed imaging of transport in wing neurons. Coupled with existing genetic tools in Drosophila, this is a tractable system for studying axonal transport over the lifespan of an animal and thus for characterising the relationship between cargo dynamics, neuronal ageing and disease. Preparation of a sample for imaging takes approximately 5 minutes, with transport typically filmed for 2–3 minutes per wing. We also document procedures for quantifying transport parameters from the acquired images and describe how the protocol can be adapted to study other cell biological processes in ageing neurons.
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