A-type lamins maintain the positional stability of DNA damage repair foci in mammalian nuclei.
A-type lamins maintain the positional stability of DNA damage repair foci in mammalian nuclei.
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DOI：
10.1371/journal.pone.0061893
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发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Venkitaraman AR
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Mahen R;Hattori H;Lee M;Sharma P;Jeyasekharan AD;Venkitaraman AR
由LMNA编码的A型核纤层蛋白在哺乳动物细胞核内形成结构性纤维网状结构。这种核组织如何影响涉及DNA交易的生物过程的执行仍不清楚。在这里，我们的特点在DNA损伤后的核纤层蛋白A/C的动力学和生化相互作用的变化。我们发现，DNA断裂降低了核质GFP-核纤层蛋白A在整个细胞核中的流动性，通过动态荧光成像和活细胞中的光谱学测量，表明掺入稳定的大分子复合物，但不会诱导GFP-核纤层蛋白A在损伤部位的局灶性积累。使用邻近连接试验和生化分析，我们表明核纤层蛋白A通过DNA损伤诱导的组蛋白H2 AX及其磷酸化形式（γ H2 AX）与染色质结合，并且这些相互作用在DNA损伤后增强。最后，我们使用三维延时成像显示，LMNA失活显着降低了活细胞中DNA修复灶的位置稳定性。GFP-核纤层蛋白A的稳定表达部分地挽救了这种缺陷。因此，总的来说，我们的研究结果表明，由A型核纤层蛋白形成的动态结构网络锚定哺乳动物细胞核中的DNA修复位点，提供了新的见解控制DNA交易的核结构组织。
A-type lamins encoded by LMNA form a structural fibrillar meshwork within the mammalian nucleus. How this nuclear organization may influence the execution of biological processes involving DNA transactions remains unclear. Here, we characterize changes in the dynamics and biochemical interactions of lamin A/C after DNA damage. We find that DNA breakage reduces the mobility of nucleoplasmic GFP-lamin A throughout the nucleus as measured by dynamic fluorescence imaging and spectroscopy in living cells, suggestive of incorporation into stable macromolecular complexes, but does not induce the focal accumulation of GFP-lamin A at damage sites. Using a proximity ligation assay and biochemical analyses, we show that lamin A engages chromatin via histone H2AX and its phosphorylated form (γH2AX) induced by DNA damage, and that these interactions are enhanced after DNA damage. Finally, we use three-dimensional time-lapse imaging to show that LMNA inactivation significantly reduces the positional stability of DNA repair foci in living cells. This defect is partially rescued by the stable expression of GFP-lamin A. Thus collectively, our findings suggest that the dynamic structural meshwork formed by A-type lamins anchors sites of DNA repair in mammalian nuclei, providing fresh insight into the control of DNA transactions by nuclear structural organization.
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在酵母和哺乳动物中，异染色质对 γ-H2AX 修饰具有抵抗力。
DOI：
10.1083/jcb.200612031
发表时间：
2007-07-16
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Kim JA;Kruhlak M;Dotiwala F;Nussenzweig A;Haber JE
通讯作者：
Haber JE
影响因子：
82.9
作者：
Liu, BH;Wang, JM;Zhou, ZJ
通讯作者：
Zhou, ZJ
影响因子：
11.4
作者：
Gonzalez-Suarez, Ignacio;Redwood, Abena B.;Gonzalo, Susana
通讯作者：
Gonzalo, Susana
影响因子：
11.4
作者：
Gonzalez-Suarez, Ignacio;Redwood, Abena B.;Gonzalo, Susana
通讯作者：
Gonzalo, Susana
影响因子：
4
作者：
Mattout, Anna;Goldberg, Michal;Gruenbaum, Yosef
通讯作者：
Gruenbaum, Yosef