Generation of recombinant and chickenized scFv versions of an anti‐kinesin monoclonal antibody H2
Generation of recombinant and chickenized scFv versions of an anti‐kinesin monoclonal antibody H2
复制标题
抗驱动蛋白单克隆抗体 H2 的重组和鸡化 scFv 版本的生成
DOI：
10.1002/cm.21756
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发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
2.9
通讯作者：
Chiba Kyoko
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Niwa Shinsuke;Chiba Kyoko
驱动蛋白-1是一种由驱动蛋白重链（KHC）和驱动蛋白轻链（KLC）组成的马达蛋白，对正常的细胞形态发生和功能至关重要。一种称为H2的单克隆抗体（mAb）识别广泛物种中的KHC，是细胞骨架运动研究中最广泛使用的mAb之一。在这里，我们提出了在哺乳动物细胞中表达重组H2的载体。我们显示重组H2在蛋白质印迹和免疫荧光测定中表现得与杂交瘤衍生的H2一样好。此外，重组H2可以检测细胞中所有三种人KHC同种型（KIF 5A、KIF 5 B和KIF 5C）和肌萎缩侧索硬化症相关的KIF 5A聚集体。此外，我们开发了一个鸡化版本的H2单克隆抗体的单链可变区片段，它可以用于免疫荧光显微镜，扩大了H2的潜在应用。总之，我们的研究结果表明，重组H2是一个有用的工具，研究KHC的功能。
Kinesin‐1, a motor protein composed of the kinesin heavy chain (KHC) and the kinesin light chain (KLC), is essential for proper cellular morphogenesis and function. A monoclonal antibody (mAb) called H2 recognizes the KHC in a broad range of species and is one of the most widely used mAbs in cytoskeletal motor research. Here, we present vectors that express recombinant H2 in mammalian cells. We show the recombinant H2 performs as well as the hybridoma‐derived H2 in both western blotting and immunofluorescence assays. Additionally, the recombinant H2 can detect all three human KHC isotypes (KIF5A, KIF5B, and KIF5C) and amyotrophic lateral sclerosis‐associated KIF5A aggregates in cells. In addition, we developed a chickenized version of the H2 mAb's single chain variable fragment, which can be used in immunofluorescence microscopy and expands the potential applications of H2. Overall, our results demonstrate that recombinant H2 is a useful tool for studying the functions of KHCs.
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DOI：
10.1093/brain/awx370
发表时间：
2018-03-01
期刊：
Brain : a journal of neurology
影响因子：
--
作者：
Brenner D;Yilmaz R;Müller K;Grehl T;Petri S;Meyer T;Grosskreutz J;Weydt P;Ruf W;Neuwirth C;Weber M;Pinto S;Claeys KG;Schrank B;Jordan B;Knehr A;Günther K;Hübers A;Zeller D;Kubisch C;Jablonka S;Sendtner M;Klopstock T;de Carvalho M;Sperfeld A;Borck G;Volk AE;Dorst J;Weis J;Otto M;Schuster J;Del Tredici K;Braak H;Danzer KM;Freischmidt A;Meitinger T;Strom TM;Ludolph AC;Andersen PM;Weishaupt JH;German ALS network MND-NET
通讯作者：
German ALS network MND-NET
影响因子：
8.8
作者：
Baron, Desiree M.;Fenton, Adam R.;Saez-Atienzar, Sara;Giampetruzzi, Anthony;Sreeram, Aparna;Shankaracharya;Keagle, Pamela J.;Doocy, Victoria R.;Smith, Nathan J.;Danielson, Eric W.;Andresano, Megan;McCormack, Mary C.;Garcia, Jaqueline;Bercier, Valerie;Van den Bosch, Ludo;Brent, Jonathan R.;Fallini, Claudia;Traynor, Bryan J.;Holzbaur, Erika L. F.;Landers, John E.
通讯作者：
Landers, John E.
影响因子：
21.3
作者：
Niwa, Shinsuke;Tanaka, Yosuke;Hirokawa, Nobutaka
通讯作者：
Hirokawa, Nobutaka
影响因子：
16.2
作者：
Kanai, Y;Dohmae, N;Hirokawa, N
通讯作者：
Hirokawa, N
通过插入诱变克隆编码秀丽隐杆线虫驱动蛋白重链的 cDNA。
DOI：
10.1073/pnas.90.19.9181
发表时间：
1993
影响因子：
11.1
作者：
N. Patel;D. Thierry;J. Mancillas
通讯作者：
J. Mancillas