Rapid and highly efficient method for scarless mutagenesis within the Salmonella enterica chromosome.
Rapid and highly efficient method for scarless mutagenesis within the Salmonella enterica chromosome.
复制标题
DOI：
10.1371/journal.pone.0015763
复制
发表时间：
2011-01-14
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Gerlach RG
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Blank K;Hensel M;Gerlach RG
通过基于重组的技术直接操作细菌染色体对于认知和应用研究变得越来越重要。在这里，我们首次展示了 Red 重组酶系统与基于 I-SceI 核酸内切酶的组合，在使用短合成寡核苷酸进行电穿孔后成功选择重组体。我们展示了使用沙门氏菌毒力相关的两组分信号系统 PhoPQ 产生无疤基因敲除以及定点诱变。所提出的方法对于在细菌染色体内产生框内删除、点突变或插入非常通用。
Direct manipulation of bacterial chromosomes by recombination-based techniques has become increasingly important for both cognitive and applied research. Here we demonstrate, for the first time, the combination of the Red recombinase system with I-SceI endonuclease-based selection of successful recombinants after electroporation with short synthetic olignucleotides. We show the generation of scarless gene knockouts as well as site-directed mutagenesis using the Salmonella virulence-associated two component signaling system PhoPQ. The presented approach is very versatile for generating in-frame deletions, point mutations or insertions within bacterial chromosomes.
登录
查看更多内容
使用侧接短同源区域的 PCR 产物对假单胞菌进行无痕连续基因修饰
影响因子：
4.2
作者：
Liang, Rubing;Liu, Jianhua
通讯作者：
Liu, Jianhua
影响因子：
3.2
作者：
Gunn, JS;Hohmann, EL;Miller, SI
通讯作者：
Miller, SI
影响因子：
3.2
作者：
MILLER, SI;MEKALANOS, JJ
通讯作者：
MEKALANOS, JJ
DOI：
10.1073/pnas.120163297
发表时间：
2000-06-06
影响因子：
11.1
作者：
Datsenko, KA;Wanner, BL
通讯作者：
Wanner, BL
影响因子：
3.9
作者：
Monsieurs, P;De Keersmaecker, S;Marchal, K
通讯作者：
Marchal, K