ParB spreading on DNA requires cytidine triphosphate in vitro
ParB spreading on DNA requires cytidine triphosphate in vitro
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ParB 在 DNA 上的扩散需要体外三磷酸胞苷
DOI：
10.1101/2019.12.11.865972
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Jalal A
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Jalal A
在所有生物体中，将遗传信息忠实地传递给下一代至关重要。SMC-ParAB-parS系统广泛用于细菌染色体分离。DNA结合蛋白ParB在ParS位点上成核，必须与邻近的DNA结合，这一过程称为扩散，以实现有效的染色体分离。尽管它的重要性，最初的几个ParB分子如何在ParSites成核招募数百个进一步的ParB扩散还没有完全了解。在这里，我们重建parS依赖的ParB传播事件使用纯化的蛋白质从新月柄杆菌，并表明CTP是所需的传播。我们进一步表明，ParB传播需要一个封闭的DNA基板，和DNA结合转录调节因子可以作为一个路障，以减弱单向传播体外。我们的生化重建概括了许多在体内观察到的ParB的特性，并开辟了途径，以研究ParB-parS与帕拉和SMC之间的相互作用。
In all living organisms, it is essential to transmit genetic information faithfully to the next generation. The SMC-ParAB-parSsystem is widely employed for chromosome segregation in bacteria. A DNA-binding protein ParB nucleates onparSsites and must associate with neighboring DNA, a process known as spreading, to enable efficient chromosome segregation. Despite its importance, how the initial few ParB molecules nucleating atparSsites recruit hundreds of further ParB to spread is not fully understood. Here, we reconstitute aparS-dependent ParB spreading event using purified proteins fromCaulobacter crescentusand show that CTP is required for spreading. We further show that ParB spreading requires a closed DNA substrate, and a DNA-binding transcriptional regulator can act as a roadblock to attenuate spreading unidirectionally in vitro. Our biochemical reconstitutions recapitulate many observed in vivo properties of ParB and opens up avenues to investigate the interactions between ParB-parSwith ParA and SMC.
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Funnell BE
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