Multiprotein Complex Production in E. coli: The SecYEG-SecDFYajC-YidC Holotranslocon.

Multiprotein Complex Production in E. coli: The SecYEG-SecDFYajC-YidC Holotranslocon.
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大肠杆菌中的多蛋白复合物生产:SecYEG-SecDFYajC-YidC Holotranslocon。

DOI:
10.1007/978-1-4939-6887-9_18
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发表时间:
2017
期刊:
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
影响因子:
--
通讯作者:
Berger I
Berger I
中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
Berger I

文献摘要

参考文献

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重组多蛋白复合物inE平衡过表达的模块化方法。以原核蛋白分泌酶/插入酶复合物SecYEG-SecDFYajC-YidC全转座子(html)为例。此程序已在这里的ACEMBL系统中实现。该方案详细介绍了单反式或多反式DNA结构的设计原则,功能性HTL的表达和纯化及其与将核糖体新生链(RNC)复合物翻译成RNC-HTL超复合物的关联。
A modular approach for balanced overexpression of recombinant multiprotein complexes inE. coliis described, with the prokaryotic protein secretase/insertase complex, the SecYEG-SecDFYajC-YidC holotranslocon (HTL), used as an example. This procedure has been implemented here in the ACEMBL system. The protocol details the design principles of the monocistronic or polycistronic DNA constructs, the expression and purification of functional HTL and its association with translating ribosome nascent chain (RNC) complexes into a RNC-HTL supercomplex.
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