Light inducible protein degradation in E. coli with the LOVdeg tag.

Light inducible protein degradation in E. coli with the LOVdeg tag.
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带有 LOVdeg 标签的大肠杆菌中的光诱导蛋白降解。

DOI:
10.1101/2023.02.25.530042
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发表时间:
2023
期刊:
bioRxiv : the preprint server for biology
影响因子:
--
通讯作者:
Dunlop,MaryJ
Dunlop,MaryJ
中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
Tague,Nathan;Coriano-Ortiz,Cristian;Sheets,MichaelB;Dunlop,MaryJ

文献摘要

参考文献

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用于光遗传学控制的分子工具允许细胞行为的空间和时间调节。特别是,光控制的蛋白质降解是一种有价值的调节机制,因为它可以是高度模块化的,与其他控制机制协同使用,并在整个生长阶段保持功能。在这里,我们设计了LOVdeg,一种可以附加到感兴趣的蛋白质上的标签,用于使用蓝光在大肠杆菌中诱导降解。我们通过使用LOVdeg标记一系列蛋白质,包括LacI阻遏物,CRISPRa激活剂和AcrB外排泵,证明了LOVdeg的模块性。此外,我们证明了将LOVdeg标签与现有的光遗传学工具配对以通过开发组合的EL222和LOVdeg系统来增强性能的实用性。最后,我们在代谢工程应用中使用LOVdeg标签来证明代谢的翻译后控制。总之,我们的结果突出了LOVdeg标签系统的模块化和功能性,并为细菌光遗传学引入了一个强大的新工具。
Molecular tools for optogenetic control allow for spatial and temporal regulation of cell behavior. In particular, light controlled protein degradation is a valuable mechanism of regulation because it can be highly modular, used in tandem with other control mechanisms, and maintain functionality throughout growth phases. Here, we engineered LOVdeg, a tag that can be appended to a protein of interest for inducible degradation in Escherichia coli using blue light. We demonstrate the modularity of LOVdeg by using it to tag a range of proteins, including the LacI repressor, CRISPRa activator, and the AcrB efflux pump. Additionally, we demonstrate the utility of pairing the LOVdeg tag with existing optogenetic tools to enhance performance by developing a combined EL222 and LOVdeg system. Finally, we use the LOVdeg tag in a metabolic engineering application to demonstrate post-translational control of metabolism. Together, our results highlight the modularity and functionality of the LOVdeg tag system, and introduce a powerful new tool for bacterial optogenetics.
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