Generation of a calmodulin-based EPR calcium indicator.

Generation of a calmodulin-based EPR calcium indicator.
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生成基于钙调蛋白的 EPR 钙指示剂。

DOI:
10.1021/bi8014295
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发表时间:
2009
期刊:
影响因子:
2.9
通讯作者:
Gross,Adrian
Gross,Adrian
中科院分区:
生物学3区
文献类型:
--
作者:
Shao,Junlong;Cieslak,John;Gross,Adrian

文献摘要

参考文献

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钙调蛋白是一种普遍存在的钙依赖蛋白。在钙存在的情况下,钙调素采用改变的构象,导致下游细胞钙信号的产生。在这里,我们描述了引入氮氧化物EPR探针到钙调素通过定点自旋标记。这些探针可以感知钙依赖性钙调蛋白的构象变化,因此可以作为钙指标。与光敏钙螯合剂结合,自旋标记的钙调素可以用来证明钙通过闪光光解释放。这些结果为用EPR光谱描述钙诱导的蛋白质构象变化的分子动力学提供了重要的一步。
Calmodulin is a ubiquitous calcium dependent protein. In the presence of calcium, calmodulin adopts an altered conformation that leads to the generation of downstream cellular calcium signals. Here we describe the introduction of nitroxide EPR probes into calmodulin by means of site-directed spin labeling. These probes sense the calcium-dependent conformational change of calmodulin and, therefore, can serve as calcium indicators. In combination with a light-sensitive calcium chelator, spin-labeled calmodulin can be used to demonstrate calcium release by flash photolysis. These results provide an important step toward describing the molecular dynamics of calcium-induced conformational changes in proteins using EPR spectroscopy.
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