Detection of Viral and Bacterial Protein in Endomyocardial Biopsies of Patients with Inflammatory Heart Muscle Disease?
Detection of Viral and Bacterial Protein in Endomyocardial Biopsies of Patients with Inflammatory Heart Muscle Disease?
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炎症性心肌病患者心内膜心肌活检中病毒和细菌蛋白的检测？
作者：
J. Davydova;S. Pankuweit;M. Crombach;H. Eckhardt;D. Strache;P. Faulhammer;B. Maisch
随着原位杂交和聚合酶链反应等高灵敏度分子生物学方法的发展，在人子宫内膜异位症活检标本中检测病毒/细菌核酸成为可能。然而，只有少数研究解决了病毒和细菌基因组的潜伏持久性问题以及相应蛋白质的检测，这可能对疾病的临床过程产生重要影响。（腺病毒、肠道病毒、巨细胞病毒、甲型和B型流感病毒，单纯疱疹病毒1和2）和细菌（衣原体肺炎）可在心肌炎和扩张型心肌病伴或不伴炎症患者的心肌内膜活检中检测到，本文应用直接免疫荧光法检测了39例心肌炎、扩张型心肌病伴或不伴炎症患者的心肌内膜活检组织，并与PCR、免疫组织学和血清学结果进行了比较。另外，通过免疫组织学方法和PCR对每个样本进行研究，以检测浸润细胞和亲心病毒或细菌的基因组。其中心肌炎14例（第1组），扩张型心肌病伴炎症9例（第2组），扩张型心肌病10例（第3组），6例无心肌炎或扩张型心肌病（第4组），1例无心肌炎或扩张型心肌病（第4组）在肌内膜活检中，B型流感病毒和肺炎衣原体抗原呈阳性。此外，我们还测定了该患者血清中的乙型流感特异性抗体，如IgG（边际滴度）和伊加（较高滴度）以及肺炎衣原体特异性抗体，如IgG（边际滴度）。第二例扩张型心肌病患者被发现肺炎衣原体蛋白阳性，其被证明具有肺炎衣原体特异性抗体，例如血清中的IgG（高滴度）。与PCR结果无相关性，但与患者血清中的流感B和肺炎衣原体特异性抗体有良好的相关性。在这项调查中，我们已经确定了病毒/细菌特异性抗体使用血清学方法和蛋白质的这些代理商使用免疫荧光。尽管在血清中检测到病毒或细菌特异性抗体，并且在活检中未发现病毒和/或细菌基因组的检测。这可能是由于心肌炎的病灶特征和取样误差造成的，因为出于技术原因，我们使用不同的活检组织进行免疫组化和分子生物学研究。病毒持续存在的问题。通过病毒蛋白的Nachweis进行病毒感染的研究，可以在Hinblick auf den Fortgang and die Behandlung der Erkrankung eine wichtige Rolle spielen.In dieser Untersuchung wurde daher der Nachweis von Protein versedener Viren und Bakterien（腺病毒、肠道病毒、Zytomegalievirus、流感病毒A和B、单纯疱疹病毒1和2，衣原体肺炎）进行免疫荧光检测，并通过分子生物学、免疫组织学和血清学方法进行检测。39例患者接受了一种急性心肌病的诊断，其中14例患者患有心肌炎（Gruppe 1），另1例患者患有急性心肌病和心肌梗死（DCMi）（Gruppe 2），另1例患者患有急性心肌病（DCM）（Gruppe 3）。Bei zehn Patienten konnten weder eine dispensative noch eine entzündliche Herzmuskelerkrankung nachgewiesen韦尔登（Gruppe 4）.一个患者群可以接种流感B和肺炎衣原体蛋白质，也可以接种韦尔登。在血清中检测IgG和IgA滴度较高的流感病毒B型患者，发现IgG滴度较高的衣原体肺炎-蛋白韦尔登。在韦尔登衣原体蛋白的免疫荧光检测中，一名DCM患者的血清学结果显示IgG滴度很高，但在其他活检中，不能用免疫荧光检测韦尔登衣原体蛋白的A型流感病毒、肠道病毒、Zytomegalie-、Parvo-和Adenoviren病毒基因组的分子生物学结果。免疫荧光检测的结果与血清学检测结果一致。一项血清学检测是一项非常重要的患者诊断，但免疫荧光检测是通过对感染患者进行诊断，从而获得了良好的疗效。
The development of highly sensitive molecular biological methods such as in-situ hybridization and polymerase chain reaction (PCR) made it possible to detect viral/bacterial nucleic acid in human endomyocardial biopsies. However, only a few investigations addressed the problem of latent persistence of viral and bacterial genome and the detection of the corresponding proteins, which could have important consequences for the clinical course of the disease.The purpose of this study was to determine whether protein of various viruses (adenovirus, enterovirus, cytomegalovirus, influenza A and B virus, herpes simplex virus 1 and 2) and bacteria (chlamydia pneumonia) can be detected in endomyocardial biopsies of patients with myocarditis and dilated cardiomyopathy with and without inflammation by use of an immunofluorescence assay and to compare the frequency of its detection with the results of PCR, immunohistology and serology.Thirty-nine patients with myocarditis and dilated cardiomyopathy with and without inflammation were examined by a direct immunofluorescence assay using the endomyocardial biopsy as antigen. Each of the samples was additionally studied by immunohistological methods and PCR for the detection of infiltrating cells and the genome of cardiotropic viruses or bacteria. Fourteen of patients were considered to have myocarditis (group 1), 9 dilated cardiomyopathy with inflammation (group 2), 10 dilated cardiomyopathy (group 3), 6 to have no myocarditis or dilated cardiomyopathy (group 4).Using a direct immunofluorescence assay we could show only that 1 patient without histological myocarditis or dilated cardiomyopathy (group 4) was positive for influenza B and chlamydia pneumonia antigens in the endomyocardial biopsy. In addition we have determined influenza B-specific antibodies, such as IgG (marginal titer) and IgA (higher titer) and chlamydia pneumonia-specific antibodies, such as IgG (marginal titer) in serum of this patient. A second patient with dilated cardiomyopathy was found to be positive for protein of chlamydia pneumonia, who was shown to have chlamydia pneumonia-specific antibodies, such as IgG (high titer) in serum. There was no correlation with PCR results, but good correlation with influenza B and chlamydia pneumonia-specific antibodies in sera of these patients. In this investigation we have determined viral/bacterial-specific antibodies using serological methods and proteins of these agents using immunoflourescence. Despite the detection of virus or bacteria-specific antibodies in the sera and detection of viral and/or bacterial genome was not found in the biopsy. This may be explained by the focal character of myocarditis and sampling error, because for technical reasons we use different biopsies for immunohistochemical and molecular biological investigations.ZusammenfassungDie Entwicklung hoch sensitiver Methoden wie Polymerasekettenreaktion (PCR) und In-situ-Hybridisierung haben den Nachweis von viralen und bakteriellen Erregern im Myokard von Patienten mit entzündlichen Herzmuskelerkrankungen möglich gemacht. Das Problem der Viruspersistenz bzw. der Virusvermehrung durch Nachweis von Virusprotein wurde jedoch bisher vernachlässigt, könnte aber im Hinblick auf den Fortgang und die Behandlung der Erkrankung eine wichtige Rolle spielen.In dieser Untersuchung wurde daher der Nachweis von Protein verschiedener Viren und Bakterien (Adenovirus, Enterovirus, Zytomegalievirus, Influenzavirus A und B, Herpes simplex-Virus 1 und 2, Chlamydia pneumonia) mittels Immunfluoreszenztest geführt und mit den molekularbiologischen, immunhistologischen und serologischen Ergebnissen verglichen. Untersucht wurden 39 Patienten mit Verdacht auf eine entzündliche Herzmuskelerkrankung, die nach immunhistologischer und molekularbiologischer Untersuchung in folgende Gruppen eingeteilt wurden: 14 Patienten mit Myokarditis (Gruppe 1), neun Patienten mit dilatativer Kardiomyopathie und Entzündung (DCMi) (Gruppe 2), zehn Patienten mit dilatativer Kardiomyopathie (DCM) (Gruppe 3). Bei zehn Patienten konnten weder eine dilatative noch eine entzündliche Herzmuskelerkrankung nachgewiesen werden (Gruppe 4). Bei einem Patienten dieser Gruppe konnte sowohl Influenza B als auch Chlamydia pneumonia Protein nachgewiesen werden. Parallel konnte im Serum dieses Patienten ein mäßiger IgG- und hoher IgA-Titer gegen Influenza B sowie ein mäßiger IgG-Titer gegen Chlamydia-pneumonia-Protein nachgewiesen werden. Bei einem Patienten mit DCM konnte im Immunfluoreszenztest Chlamydia-pneumonia-Protein in der Biopsie nachgewisen werden, serologisch wurde ein hoher IgG-Titer gefunden.In keiner der untersuchten Biopsien konnte neben dem molekularbiologischen Nachweis des Genoms von Influenzavirus A, Enteroviren, Zytomegalie-, Parvo- und Adenoviren auch der Proteinnachweis mittels Immunfluoreszenztest geführt werden. Die Ergebnisse der Immunfluoreszenzuntersuchung korrelieren jedoch sehr gut mit den serologischen Untersuchungen.Eine anschließende Untersuchung an einem größeren Patientenkollektiv soll klären, ob sich die Immunfluoreszenzuntersuchung als ergänzende Diagnostik bei Patienten mit Verdacht auf eine infektiöse, entzündliche Herzmuskelerkrankung eignet.
特发性扩张型心肌病和其他人体心脏组织中肠道病毒 RNA 的检测。
DOI：
10.1172/jci115830
发表时间：
1992
期刊：
The Journal of clinical investigation
影响因子：
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作者：
Weiss,LM;Liu,XF;Chang,KL;Billingham,ME
通讯作者：
Billingham,ME