Next generation histology methods for three-dimensional imaging of fresh and archival human brain tissues.
Next generation histology methods for three-dimensional imaging of fresh and archival human brain tissues.
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DOI：
10.1038/s41467-018-03359-w
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发表时间：
2018-03-14
影响因子：
16.6
通讯作者：
Gentleman SM
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Lai HM;Liu AKL;Ng HHM;Goldfinger MH;Chau TW;DeFelice J;Tilley BS;Wong WM;Wu W;Gentleman SM
用于神经组织微观结构的三维（3D）可视化的现代清除技术在用于啮齿动物大脑时非常有效，但很少有研究将其用于人脑材料，主要是由于处理死后组织的固有困难。在这里，我们开发了一种组织清除解决方案，OPTIClar，为新鲜和存档的人脑组织进行了优化，包括福尔马林固定的石蜡包埋材料。鉴于组织清除中免疫染色的实际挑战，我们采用甲酚紫对清除组织中的神经元进行可视化，并有可能在感兴趣的区域进行3D定量。此外，我们使用亲脂性示踪剂追踪死后组织中的神经元过程，从而能够在3D中研究人类树突棘的形态。这些不同的人类组织清除策略的发展具有广泛的适用性，我们希望，将为进一步的技术发展提供一个基线。目前可用的组织清除技术主要用于啮齿动物组织。在这里，作者开发了用于新鲜和存档人脑组织清除的OPTIClear解决方案，并建立了用于三维组织学研究的相关协议。
Modern clearing techniques for the three-dimensional (3D) visualisation of neural tissue microstructure have been very effective when used on rodent brain but very few studies have utilised them on human brain material, mainly due to the inherent difficulties in processing post-mortem tissue. Here we develop a tissue clearing solution, OPTIClear, optimised for fresh and archival human brain tissue, including formalin-fixed paraffin-embedded material. In light of practical challenges with immunostaining in tissue clearing, we adapt the use of cresyl violet for visualisation of neurons in cleared tissue, with the potential for 3D quantification in regions of interest. Furthermore, we use lipophilic tracers for tracing of neuronal processes in post-mortem tissue, enabling the study of the morphology of human dendritic spines in 3D. The development of these different strategies for human tissue clearing has wide applicability and, we hope, will provide a baseline for further technique development. Current available tissue clearing techniques are mostly used for rodent tissues. Here, the authors develop OPTIClear solution for fresh and archival human brain tissue clearing and establish associated protocols for three-dimensional histological investigations.
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影响因子：
5.3
作者：
MUFSON, EJ;BOTHWELL, M;KORDOWER, JH
通讯作者：
KORDOWER, JH
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影响因子：
64.5
作者：
Murray E;Cho JH;Goodwin D;Ku T;Swaney J;Kim SY;Choi H;Park YG;Park JY;Hubbert A;McCue M;Vassallo S;Bakh N;Frosch MP;Wedeen VJ;Seung HS;Chung K
通讯作者：
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影响因子：
64.8
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通讯作者：
--
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作者：
Phillips J;Laude A;Lightowlers R;Morris CM;Turnbull DM;Lax NZ
通讯作者：
Lax NZ
影响因子：
5.5
作者：
LAWSON, SN;WADDELL, PJ
通讯作者：
WADDELL, PJ