The two isozymes of rat intestinal alkaline phosphatase are products of two distinct genes.
The two isozymes of rat intestinal alkaline phosphatase are products of two distinct genes.
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大鼠肠碱性磷酸酶的两种同工酶是两个不同基因的产物。
DOI：
10.1152/physiolgenomics.2000.3.1.1
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发表时间：
2000
影响因子：
4.6
通讯作者：
Alpers,DH
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Xie,Q;Alpers,DH
谢，Q，和D. H.大鼠肠碱性磷酸酶的两种同工酶是两种不同基因的产物。生理学基因组学3：1-8，2000。大鼠肠道碱性磷酸酶（IAP-I和-II）在一级结构、底物特异性、组织定位和对脂肪喂养的反应方面存在差异。这项研究确定了两个不同的基因（约15 -6 kb），对应于每种同工酶，并含有11个外显子的几乎相同的大小。外显子-内含子连接与其他物种IAP基因中发现的连接相同。从每个基因中分离的1.7和1.2 bp的5′侧翼区分别含有Sp1和肠道富集的Kruppel样因子（GKLF）结合位点，但在其他方面几乎没有相同之处。在IAP-Ⅰ上游36 bp处，距转录起始位点5′端14 bp处有一个CAAT盒;在IAP-Ⅱ上游55 bp处，距转录起始位点5′端31 bp处有一个TATA盒。将这些启动子区（与作为报告基因的荧光素酶连接）转染到肾细胞系COS-7中，产生了体内研究所预期的对油酸的差异应答，即，使用IAP-II的5′侧翼区，而不是IAP-I，增加了3倍。这种反应没有重现5，8，11，14-二十碳四炔酸（ETYA）或氯贝特，这表明过氧化物酶体增殖反应元件不参与。IAP-II基因的分离将允许确定肠上皮细胞中负责膳食脂肪反应的序列。
Xie, Q., and D. H. Alpers.The two isozymes of rat intestinal alkaline phosphatase are products of two distinct genes.Physiol Genomics3: 1–8, 2000.—Rat intestinal alkaline phosphatases (IAP-I and -II) differ in primary structure, substrate specificity, tissue localization, and response to fat feeding. This study identifies two distinct genes (∼5–6 kb) corresponding to each isozyme and containing 11 exons of nearly identical size. The exon-intron junctions are identical with those found in IAP genes from other species. The 1.7 and 1.2 bp of 5′ flanking regions isolated from each gene, respectively, contain Sp1 and gut-enriched Kruppel-like factor (GKLF) binding sites, but otherwise show little identity. There is a potential CAAT-box 14 bp 5′ to the transcriptional start site, 36 bp upstream from IAP-I, and a TATA-box 31 bp 5′ to the transcriptional start site, 55 bp upstream from IAP-II. Transfection of these promoter regions (linked to luciferase as a reporter gene) into a kidney cell line, COS-7, produced the differential response to oleic acid expected from in vivo studies, i.e., threefold increase using the 5′ flanking region of IAP-II, but not IAP-I. This response was not reproduced by 5,8,11,14-eicosatetraynoic acid (ETYA) or clofibrate, suggesting that peroxisome proliferator response elements are not involved. Isolation of the IAP-II gene will allow determination of the sequences responsible for dietary fat response in the enterocyte.
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