Cyclin-dependent kinase-mediated phosphorylation and the negative regulatory domain of transcription factor B-Myb modulate its DNA binding.
Cyclin-dependent kinase-mediated phosphorylation and the negative regulatory domain of transcription factor B-Myb modulate its DNA binding.
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DOI：
10.1016/j.jbc.2022.102319
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发表时间：
2022-09
影响因子：
4.8
通讯作者：
Rubin, Seth M.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Wijeratne, Tilini U.;Guiley, Keelan Z.;Lee, Hsiau-Wei;Muller, Gerd A.;Rubin, Seth M.
B-Myb 是脊椎动物 Myb 转录因子家族中高度保守的成员，在细胞周期进展和增殖中发挥着关键作用。 Myb 蛋白利用其 DNA 结合域 (DBD) 与 Myb 结合位点 (MBS) 序列特异性相互作用，从而激活 Myb 依赖性启动子。 B-Myb 对 MBS 启动子的反式激活受到其负调控域 (NRD) 的抑制，而 Cdk2-CyclinA 对 NRD 的磷酸化可解除抑制，从而激活 B-Myb 依赖性启动子。然而，B-Myb 介导的转录的自抑制和激活的结构机制尚不清楚。在这里，我们确定 B-Myb NRD 中的一个区域（残基 510-600）直接与 DBD 相关，并抑制 DBD 与 MBS DNA 序列的结合。我们使用生物物理测定证明，NRD 在 T515、T518 和 T520 处的磷酸化足以破坏 NRD 和 DBD 之间的相互作用，从而导致细胞测定中对 MBS DNA 的亲和力增加并增加 B-Myb 依赖性启动子激活。我们对 B-Myb 自身调节的生化特征和磷酸化的激活作用提供了对 B-Myb 如何作为位点特异性转录因子发挥作用的深入了解。
B-Myb is a highly conserved member of the vertebrate Myb family of transcription factors that plays a critical role in cell-cycle progression and proliferation. Myb proteins activate Myb-dependent promoters by interacting specifically with Myb-binding site (MBS) sequences using their DNA-binding domain (DBD). Transactivation of MBS promoters by B-Myb is repressed by its negative regulatory domain (NRD), and phosphorylation of the NRD by Cdk2-CyclinA relieves the repression to activate B-Myb–dependent promoters. However, the structural mechanisms underlying autoinhibition and activation of B-Myb–mediated transcription have been poorly characterized. Here, we determined that a region in the B-Myb NRD (residues 510–600) directly associates with the DBD and inhibits binding of the DBD to the MBS DNA sequence. We demonstrate using biophysical assays that phosphorylation of the NRD at T515, T518, and T520 is sufficient to disrupt the interaction between the NRD and the DBD, which results in increased affinity for MBS DNA and increased B-Myb–dependent promoter activation in cell assays. Our biochemical characterization of B-Myb autoregulation and the activating effects of phosphorylation provide insight into how B-Myb functions as a site-specific transcription factor.
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影响因子：
4.7
作者：
Ansieau, S;KowenzLeutz, E;Leutz, A
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Bessa, M;Saville, MK;Watson, RJ
通讯作者：
Watson, RJ
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作者：
BIEDENKAPP, H;BORGMEYER, U;KLEMPNAUER, KH
通讯作者：
KLEMPNAUER, KH
DOI：
10.1016/j.bbagrm.2012.03.008
发表时间：
2012-08-01
影响因子：
4.7
作者：
Down, Christin F.;Millour, Julie;Watson, Roger J.
通讯作者：
Watson, Roger J.
影响因子：
8
作者：
Lane, S;Farlie, P;Watson, R
通讯作者：
Watson, R