Making In Situ Whole-Cell Patch-Clamp Recordings from Xenopus laevis Tadpole Neurons.

Making In Situ Whole-Cell Patch-Clamp Recordings from Xenopus laevis Tadpole Neurons.
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从非洲爪蟾蝌蚪神经元进行原位全细胞膜片钳记录。

DOI:
10.1101/pdb.prot106856
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发表时间:
2021
影响因子:
--
通讯作者:
Li WC
Li WC
中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
Li WC

文献摘要

参考文献

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非洲爪蟾蝌蚪是研究脊髓和脑干运动中心的基本组织和生理的一个极好的、简单的脊椎动物模型。在过去,脊髓和脑干神经元的细胞内记录主要是使用锋利的电极,尽管全细胞膜片钳技术自20世纪80年代初就已经出现了。在本协议中,我描述了原位全细胞膜片钳记录所需的解剖和程序,自21世纪初以来,这已成为蝌蚪神经生理学的常规方法。解剖的关键步骤是在不切断轴突束的情况下,小心地去除蝌蚪神经鞘内的一些室管膜细胞,以暴露干净的神经元体。然后可以通过电流或电压箝位模式对体细胞进行全细胞记录。
Xenopus laevis tadpoles have been an excellent, simple vertebrate model for studying the basic organization and physiology of the spinal cord and motor centers in the brainstem. In the past, intracellular recordings from the spinal and brainstem neurons were primarily made using sharp electrodes, although whole-cell patch-clamp technology has been around since the early 1980s. In this protocol, I describe the dissections and procedures needed for in situ whole-cell patch-clamp recording, which has become routine in tadpole neurophysiology since the early 2000s. The critical step in the dissections is to delicately remove some ependymal cells lining the tadpole neurocoele in order to expose clean neuronal somata without severing axon tracts. Whole-cell recordings can then be made from the somata in either current-or voltage-clamp mode.
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