Interstrand crosslinking of homologous repair template DNA enhances gene editing in human cells.
Interstrand crosslinking of homologous repair template DNA enhances gene editing in human cells.
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DOI：
10.1038/s41587-022-01654-y
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发表时间：
2023-10
影响因子：
46.9
通讯作者：
Richardson, Chris D.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Ghasemi, Hannah I.;Bacal, Julien;Yoon, Amanda C.;Tavasoli, Katherine U.;Cruz, Carmen;Vu, Jonathan T.;Gardner, Brooke M.;Richardson, Chris D.
我们描述了一种通过同源定向修复（HDR）通过链间交联共价修饰模板 DNA 来提高基因编辑效率的策略。交联模板 (xHDRT) 将 K562、HEK293T、U2OS、iPS 和原代 T 细胞中 Cas9 介导的编辑效率提高了五倍。 xHDRT 的编辑增加是由模板分子上的事件驱动的，并且需要共济失调性毛细血管扩张和 Rad3 相关 (ATR) 激酶以及 Fanconi 贫血途径的组件。通过交联模板 DNA 可以提高同源重组的效率。
We describe a strategy to boost the efficiency of gene editing via homology-directed repair (HDR) by covalently modifying the template DNA with interstrand crosslinks. Crosslinked templates (xHDRTs) increase Cas9-mediated editing efficiencies by up to fivefold in K562, HEK293T, U2OS, iPS and primary T cells. Increased editing from xHDRTs is driven by events on the template molecule and requires ataxia telangiectasia and Rad3-related (ATR) kinase and components of the Fanconi anemia pathway. The efficiency of homologous recombination is increased by crosslinking template DNA.
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