NanoTag Nanobody Tools for Drosophila In Vitro and In Vivo Studies.
NanoTag Nanobody Tools for Drosophila In Vitro and In Vivo Studies.
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DOI：
10.1002/cpz1.628
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发表时间：
2022-12
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Perrimon, Norbert
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Kim, Ah-Ram;Xu, Jun;Cheloha, Ross;Mohr, Stephanie E.;Zirin, Jonathan;Ploegh, Hidde L.;Perrimon, Norbert
纳米抗体已经成为揭示蛋白质功能的强大蛋白质结合工具。使用功能化的蛋白质结合剂，可以在体内使感兴趣的蛋白质可视化、降解、离域或后修饰。我们最近报道了使用两个短肽标签，10 aa 127 D01和14 aa VHH 05，以及它们相应的纳米抗体，Nb127 D01和NbVHH 05，在果蝇的体外和体内研究。在这里，我们提供了纳米抗体生产的详细协议，并在固定或活样品中的感兴趣的蛋白质的可视化。此外，我们还包括使用CRISPR介导的基因组工程进行内源性蛋白质标记的方案。
Nanobodies have emerged as powerful protein-binding tools to uncover protein functions. Using functionalized protein binders, proteins of interest can be visualized, degraded, delocalized, or post-translationally modified in vivo. We recently reported the use of two short peptide tags, 10 aa 127D01 and 14 aa VHH05, and their corresponding nanobodies, Nb127D01 and NbVHH05, for both in vitro and in vivo studies in Drosophila. Here, we provide detailed protocols for nanobody production and for visualization of proteins-of-interest in either fixed or live samples. In addition, we include protocols for endogenous protein tagging using CRISPR-mediated genome engineering.
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影响因子：
--
作者：
Gallagher, Sean R
通讯作者：
Gallagher, Sean R
影响因子：
3.6
作者：
Bradley, M. E.;Dombrecht, B.;Cromie, K. D.
通讯作者：
Cromie, K. D.
DOI：
10.1073/pnas.2021996118
发表时间：
2021-01-05
影响因子：
11.1
作者：
Bosch, Justin A.;Birchak, Gabriel;Perrimon, Norbert
通讯作者：
Perrimon, Norbert
影响因子：
64.8
作者：
Anzalone, Andrew V.;Randolph, Peyton B.;Liu, David R.
通讯作者：
Liu, David R.
影响因子：
16.8
作者：
Caussinus, Emmanuel;Kanca, Oguz;Affolter, Markus
通讯作者：
Affolter, Markus