Crystal structure and self-interaction of the type VI secretion tail-tube protein from enteroaggregative Escherichia coli.
Crystal structure and self-interaction of the type VI secretion tail-tube protein from enteroaggregative Escherichia coli.
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DOI：
10.1371/journal.pone.0086918
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发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Cambillau C
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Douzi B;Spinelli S;Blangy S;Roussel A;Durand E;Brunet YR;Cascales E;Cambillau C
VI 型分泌系统（T6SS）是细菌广泛使用的机器，用于通过注射毒素来控制其环境并杀死或禁用细菌物种或真核生物。 T6SS 包括由溶血素共调节蛋白 (Hcp) 堆叠六聚体形成的中心管，并由三聚缬氨酸-甘氨酸重复蛋白 G (VgrG) 组件（细胞穿刺装置）终止。由 TssB 和 TssC 蛋白形成的可收缩尾鞘围绕着该管。这种类似注射器的机器与反向噬菌体进行了比较，因为 Hcp 和 VgrG 与有尾病毒目的尾部成分具有结构同源性。在这里，我们解析了来自肠聚集性大肠杆菌的 Hcp1 色氨酸取代双突变体的晶体结构，并将其与其他 Hcp 的结构进行了比较。有趣的是，我们观察到纯化的 Hcp 天然蛋白无法在体外形成管。为了更好地理解观察的基本原理，我们通过表面等离子体共振测量了 Hcp1 六聚体与其自身的亲和力。六聚体内相互作用较弱，KD 值为 7.2 µM。然而，通过在指定位置设计双半胱氨酸突变体，Hcp1 管在氧化条件下形成聚集多达 15 个堆叠的六聚体。这些结果与文献中有关 TssB 和 TssC 的结果一起表明 T6SS 管的组装与 Sipho- 或 Myoviridae 的组装显着不同。
The type VI secretion system (T6SS) is a widespread machine used by bacteria to control their environment and kill or disable bacterial species or eukaryotes through toxin injection. The T6SS comprises a central tube formed of stacked hexamers of hemolysin co-regulated proteins (Hcp) and terminated by a trimeric valine-glycine repeat protein G (VgrG) component, the cell puncturing device. A contractile tail sheath, formed by the TssB and TssC proteins, surrounds this tube. This syringe-like machine has been compared to an inverted phage, as both Hcp and VgrG share structural homology with tail components of Caudovirales. Here we solved the crystal structure of a tryptophan-substituted double mutant of Hcp1 from enteroaggregative Escherichia coli and compared it to the structures of other Hcps. Interestingly, we observed that the purified Hcp native protein is unable to form tubes in vitro. To better understand the rationale for observation, we measured the affinity of Hcp1 hexamers with themselves by surface plasmon resonance. The intra-hexamer interaction is weak, with a KD value of 7.2 µM. However, by engineering double cysteine mutants at defined positions, tubes of Hcp1 gathering up to 15 stacked hexamers formed in oxidative conditions. These results, together with those available in the literature regarding TssB and TssC, suggest that assembly of the T6SS tube differs significantly from that of Sipho- or Myoviridae.
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影响因子：
6.7
作者：
Felisberto-Rodrigues C;Durand E;Aschtgen MS;Blangy S;Ortiz-Lombardia M;Douzi B;Cambillau C;Cascales E
通讯作者：
Cascales E
DOI：
10.1107/s0907444904019158
发表时间：
2004-12-01
影响因子：
2.2
作者：
Emsley, P;Cowtan, K
通讯作者：
Cowtan, K
影响因子：
5.7
作者：
Aksyuk, Anastasia A.;Kurochkina, Lidia P.;Rossmann, Michael G.
通讯作者：
Rossmann, Michael G.
影响因子：
3.6
作者：
Kapitein, Nicole;Boenemann, Gabriele;Mogk, Axel
通讯作者：
Mogk, Axel
影响因子：
64.5
作者：
Basler M;Ho BT;Mekalanos JJ
通讯作者：
Mekalanos JJ