Specific modulation of protein activity by using a bioorthogonal reaction.
Specific modulation of protein activity by using a bioorthogonal reaction.
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DOI：
10.1002/cbic.201402423
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发表时间：
2014-11-24
期刊：
影响因子：
3.2
通讯作者：
Petersson, E. James
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Warner, John B.;Muthusamy, Anand K.;Petersson, E. James
关键词：
具有生物正交反应基团的非天然氨基酸具有提供用于共价抑制感兴趣的蛋白质的快速和特异性机制的潜力。在这里，我们使用非天然诱变将叠氮化物（Z）插入靶蛋白的位置，使得与炔调节剂（X）的“点击”反应将改变蛋白质功能。这种生物正交反应对可以产生X对含Z蛋白质的特异性，即使靶标在其他方面与另一种蛋白质相同，也允许在活细胞中进行快速靶标验证。我们证明我们的方法使用抑制E。大肠杆菌酶氨酰转移酶的活性位点封闭和变构机制。这种“可点击的魔术子弹”策略应该普遍适用于蛋白质抑制，在非天然氨基酸诱变的限制内。
Unnatural amino acids with bioorthogonal reactive groups have the potential to provide a rapid and specific mechanism for covalently inhibiting a protein of interest. Here, we use unnatural mutagenesis to insert an azide (Z) into the target protein at positions such that a “click” reaction with an alkyne modulator (X) will alter protein function. This bioorthogonal reactive pair can engender specificity of X for the Z-containing protein even if the target is otherwise identical to another protein, allowing for rapid target validation in living cells. We demonstrate our method using inhibition of the E. coli enzyme aminoacyl transferase by both active site occlusion and allosteric mechanisms. This “clickable magic bullet” strategy should be generally applicable to protein inhibition, within the limits of unnatural amino acid mutagenesis.
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影响因子：
15
作者：
Blackman, Melissa L.;Royzen, Maksim;Fox, Joseph M.
通讯作者：
Fox, Joseph M.
影响因子：
3.2
作者：
Connor, Rebecca E.;Piatkov, Konstantin;Tirrell, David A.
通讯作者：
Tirrell, David A.
DOI：
10.1073/pnas.97.17.9367
发表时间：
2000-08-15
影响因子：
11.1
作者：
Erlanson, DA;Braisted, AC;Wells, JA
通讯作者：
Wells, JA
影响因子：
48
作者：
Erster, Oran;Eisenstein, Miriam;Liscovitch, Mordechai
通讯作者：
Liscovitch, Mordechai
影响因子：
1.6
作者：
Arduini, RM;Li, ZF;Baker, DP
通讯作者：
Baker, DP