Development of shuttle vectors for evaluation of essential regulator regulated gene expression in Staphylococcus aureus.
Development of shuttle vectors for evaluation of essential regulator regulated gene expression in Staphylococcus aureus.
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DOI：
10.1016/j.plasmid.2009.02.001
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发表时间：
2009-05
期刊：
影响因子：
2.6
通讯作者：
Ji Y
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Yan M;Yu C;Yang J;Ji Y
我们描述了一系列金黄色葡萄球菌穿梭载体的构建。为了确定基本调控因子的转录调控作用，我们使用由金黄色葡萄球菌质粒pE194、Gram -质粒pUC18、TetR调控盒和Pxyl/teto驱动的yhcS反义表达构建物组成的TetR调控反义RNA表达载体pJYJ909构建了无启动子luxABCDE报告系统。利用重组的穿梭载体构建opuCA启动子- luxabcde融合，同时通过测量下调yhcSR时的生物发光强度来检测转录调控。此外，我们利用同一质粒pJYJ909构建了pspace驱动的恒定表达系统，从而确定了yhcSR调控的opuCA操纵子过表达的互补效应。这些质粒为阐明金黄色葡萄球菌中细菌生长所必需的基因调控机制提供了重要的工具。
We describe the construction of a series of shuttle vectors for Staphylococcus aureus. In order to determine transcriptional regulation by essential regulators, we constructed promoterless luxABCDE reporter system using a TetR-regulated antisense RNA expression vector, pJYJ909, which is composed of S. aureus plasmid pE194, the Gram− plasmid pUC18, a TetR regulatory cassette, and Pxyl/teto-driven yhcS antisense expression construct. The reformed shuttle vector was utilized to construct an opuCA promoter-luxABCDE fusion and simultaneously examine transcriptional regulation by measuring bioluminescence intensity during down-regulating yhcSR. In addition, we utilized the same plasmid, pJYJ909, and constructed a Pspac-driven constant expression system, which allows us to determine the complementary effect of overexpression of opuCA operon modulated by yhcSR. These plasmids provide important tools for elucidating regulatory mechanisms for genes that are essential for bacterial growth in S. aureus.
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影响因子：
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作者：
Cormack, BP;Valdivia, RH;Falkow, S
通讯作者：
Falkow, S
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作者：
Sun, JS;Zheng, L;Ji, YD
通讯作者：
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作者：
Forsyth, RA;Haselbeck, RJ;Zyskind, JW
通讯作者：
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3.2
作者：
Ji, YD;Marra, A;Woodnutt, G
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作者：
Huang, JZ;O'Toole, PW;McDevitt, D
通讯作者：
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