Accurate gene synthesis with tag-directed retrieval of sequence-verified DNA molecules.
Accurate gene synthesis with tag-directed retrieval of sequence-verified DNA molecules.
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DOI：
10.1038/nmeth.2137
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发表时间：
2012-09
期刊：
影响因子：
48
通讯作者：
Shendure, Jay
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Schwartz, Jerrod J.;Lee, Choli;Shendure, Jay
我们提出了拨出PCR，一种高度并行的方法，用于检索准确的DNA分子的基因合成。在大规模平行测序之前，用独特的侧翼标签修饰DNA分子的复杂文库。然后，标签引导的引物使得能够通过PCR检索具有所需序列的分子。拨出PCR能够进行多重体外克隆筛选，是体内克隆和桑格测序的一种引人注目的替代方法，可用于精确的基因合成。
We present dial-out PCR, a highly parallel method for retrieving accurate DNA molecules for gene synthesis. A complex library of DNA molecules is modified with unique flanking tags before massively parallel sequencing. Tag-directed primers then enable the retrieval of molecules with desired sequences by PCR. Dial-out PCR enables multiplex in vitro clone screening and is a compelling alternative to in vivo cloning and Sanger sequencing for accurate gene synthesis.
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