Replication competent molecular clones of HIV-1 expressing Renilla luciferase facilitate the analysis of antibody inhibition in PBMC.
Replication competent molecular clones of HIV-1 expressing Renilla luciferase facilitate the analysis of antibody inhibition in PBMC.
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DOI：
10.1016/j.virol.2010.08.028
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发表时间：
2010-12-05
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
Ochsenbauer C
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Edmonds TG;Ding H;Yuan X;Wei Q;Smith KS;Conway JA;Wieczorek L;Brown B;Polonis V;West JT;Montefiori DC;Kappes JC;Ochsenbauer C
人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）的有效疫苗开发将需要确定疫苗免疫原引发不同HIV-1毒株的中和抗体（NAb）的能力的测定。为了便于在基于外周血单核细胞（PBMC）的测定中进行NAb评估，我们开发了一种基于表达HIV-1前病毒骨架的海肾荧光素酶（LucR）的测定适应性平台。将LucR插入到pNL 4 -3 DNA中，保留所有病毒开放阅读框。原病毒基因组被改造以促进不同HIV-1 env序列的表达，从而允许在同基因背景下进行分析。所得的Env-IMC-LucR病毒是感染性的，并且LucR在PBMC中的多次复制中稳定表达。靶向TZM-bl细胞的HIV-1中和与病毒（LucR）和细胞（萤火虫荧光素酶）读数相比高度相关。在PBMC中，可以在单个或多个复制循环内分析NAb活性。这些结果代表了用于评估HIV-1疫苗免疫原效力的基于PBMC的中和试验的进展。
Effective vaccine development for human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) will require assays that ascertain the capacity of vaccine immunogens to elicit neutralizing antibodies (NAb) to diverse HIV-1 strains. To facilitate NAb assessment in peripheral blood mononuclear cell (PBMC)-based assays, we developed an assay-adaptable platform based on a Renilla luciferase (LucR) expressing HIV-1 proviral backbone. LucR was inserted into pNL4-3 DNA, preserving all viral open reading frames. The proviral genome was engineered to facilitate expression of diverse HIV-1 env sequences, allowing analysis in an isogenic background. The resulting Env-IMC-LucR viruses are infectious, and LucR is stably expressed over multiple replications in PBMC. HIV-1 neutralization, targeting TZM-bl cells, was highly correlative comparing virus (LucR) and cell (firefly luciferase) readouts. In PBMC, NAb activity can be analyzed either within a single or multiple cycles of replication. These results represent advancement toward a standardizable PBMC-based neutralization assay for assessing HIV-1 vaccine immunogen efficacy.
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影响因子：
5.4
作者：
Gauduin, MC;Allaway, GP;Koup, RA
通讯作者：
Koup, RA
影响因子：
5.4
作者：
Hioe, CE;Chien, PC;Tuen, M
通讯作者：
Tuen, M
影响因子：
5.4
作者：
CHEN, BK;SAKSELA, K;BALTIMORE, D
通讯作者：
BALTIMORE, D
DOI：
10.1073/pnas.0306764101
发表时间：
2004-03-23
影响因子：
11.1
作者：
Levy, DN;Aldrovandi, GM;Shaw, GM
通讯作者：
Shaw, GM
影响因子：
5.4
作者：
Bastiani, L;Laal, S;ZollaPazner, S
通讯作者：
ZollaPazner, S